抗vegf单克隆抗体bd0801对人肝细胞癌细胞株smmc-7721体外增殖的影响及可能机制

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1、隶I初大·粤临床医学硕士学位论文万方数据抗VEGF单克隆抗体BD0801对人肝细胞癌细胞株SMMC一7721体外增殖的影响及可能机制姗LUENCE万方数据OFANTI．VEGFMONOCLONALANTIBODYBD0801ONTHEPROLIFERATIONHUMANHEPATOCARCINOMACELLLINESMMC．7721烈ⅥTROANDITSMECHANISMS删y2刺708120～ADissertationSubmittedtoSoutheastUniversityFortheDegreeofMasterofMediealBYLIU，Zhe

2、ngCaoSupervisedbyDr．LIU，Lin秒reVm4喊加ehUOS万方数据东南大学学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得东南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：日期：坐出!≤：≥东南大学学位论文使用授权声明东南大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆有权保留本人所送交学位论文的复印

3、件和电子文档，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。除在保密期内的保密论文外，允许论文被查阅和借阅，可以公布(包括以电子信息形式刊登)论文的全部内容或中、英文摘要等部分内容。论文的公布(包括以电子信息形式刊登)授权东南大学研究生院办理。亚研究生签名：万方数据中文摘要抗VEGF单克隆抗体BD0801对人肝细胞癌细胞株SMMC．7721体外增殖的影响及可能机制目的：研究人源化抗VEGF单克隆抗体BD0801单药及联合奥沙利铂(Oxaliplatin，OXA)对人肝细胞癌细胞株SMMC．7721的体外增殖抑制作用及

4、其相关的作用机制。方法：以SMMC．7721细胞作为实验对象，实验设立阴性对照组(未加药)、阳性对照组[贝伐珠单抗(Bevacizumab，Bev)、OXA单药处理组，Bev联合OXA处理组]和实验组(BD0801单药处理组，BD0801联合OXA处理组)。应用四甲基偶氮唑蓝比色法(M1vr)测定细胞增殖抑制率；流式细胞术分析细胞凋亡率和细胞周期变化；蛋白印迹法(WesternBlot)检测细胞VEGF、KDR、pKDR蛋白表达水平。所有实验均重复3次，结果以均数4-标准差(出)表示，P<0．05被认为有统计学意义。结果：1、BD0801单药在体外能抑制

5、SMMC．7721细胞增殖，在O．1～10扯g／ml浓度范围内，其抑制作用有一定的浓度依赖性。与Bev单药相比，两种单药之间的抑制作用无明显差异(P值均>0．05)。而OXA单药的抑制细胞生长作用明显强于BD0801单药及Bev单药(P<0．05)。与各单药组相比，联合用药组均能显著增强对SMMC．7721细胞的增殖抑制作用(P值均<0．05)，而两联合用药组之间抑制率相比，差异无统计学意义(尸>O．05)。与阴性对照组相比，BD0801能有效诱导SMMC．7721细胞凋亡(尸O．05)

6、；OXA单药诱导细T万方数据东南大学硕士学位论文胞凋亡率明显高于BD0801单药和Bev单药(尸值均<0．01)；与各单药相比，联合用药能显著增强对SMMC一7721细胞的诱导凋亡作用(P值均O．05)。2、与阴性对照组相比，不同浓度BD0801单药或Bev单药作用SMMC．7721细胞48h后，Go／Gl期细胞比例均上升，S期细胞比例均下降，此变化趋势呈药物浓度依赖性(尸值均<0．05)；OXA作用细胞48h后，S期细胞比例上升，Go／Gl期细胞比例下降(P<0．001)；BD0801或B

7、ev联合OXA作用细胞48h后，各组S期细胞比例均上升(尸值均<0．01)。3、WesternBlot结果显示，与阴性对照组相比，BD0801或Bev单药作用SMMC．7721细胞48h后，均能抑制细胞VEGF和pKDR蛋白水平的表达(尸值均<0．01)；且BD0801与Bev单药相比，对细胞VEGF／KDR通路的抑制作用无差异(尸>0．05)。与阴性对照组相比，BD0801或Bev联合OXA作用细胞48h后，均能抑制VEGF和pKDR蛋白水平的表达(尸值均<0．01)，但与BD0801或Bev单药相比，各联合用药组对VEGF／KDR通路的抑制作用无差异

8、(尸值均>O．05)。结论：BD0801在体外呈浓度依赖性抑制人HCC细胞株SM