富自体浓缩生长因子纤维蛋白凝胶(液体)活性因子及其含量分析

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1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文,第一署名为单位河北医科大学,试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则,承担相应法律责任。研究生签名:稍导师签章二级学院领导盖伽,甲年弓月≥『日河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特别加以标注和致

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3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28综述富自体浓缩生长因子纤维蛋白凝胶在口腔医学中的应用⋯⋯⋯..35致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42个人简历

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43中文摘要富自体浓缩生长因子纤维蛋白凝胶(液体)活性因子及其含量分析摘要目的:富自体浓缩生长因子(ConcentratedGrowthFactors,CGF)纤维蛋白凝胶(液体)是通过差速不间断离心技术获取的血液提取物,含有多种生长因子及纤维蛋白,具有促进细胞增殖、分化、趋化和刺激血管化的功能,能够加速软硬组织修复,是再生医疗领域中的新技术。富自体CGF纤维蛋白凝胶可应用于修复骨缺损、牙周组织缺损、软组织创伤和上颌窦底提升术等方面。本实验采用酶联免疫吸附法检测三种不同处理

5、离心管制取的富自体CGF纤维蛋白凝胶(液体)中活性因子及其含量,探讨三种离心管制备的富自体CGF纤维蛋白凝胶(液体)中活性因子及含量的不同,为临床应用富自体CGF纤维蛋白凝胶(液体)提供理论依据。方法:1研究对象入选标准选择五位健康志愿者(男3例,女2例)。入选标准:1.1年龄在18~23岁之间;1.2无肝炎史,无免疫疾病史;1.3采血前一个月无感染史,无服用抗菌药史;1.4采血前3个月未服用阿司匹林等影响血细胞的药物;1.5女性志愿者未在月经期;1.6志愿者知情并同意采血用于本实验。2实验步骤2.1实验分组根据不同处理的M

6、edifuge离心制造机特殊匹配试管(9ml,真空负压)制备的富自体CGF纤维蛋白凝胶(液体)性状不同分为三组:A组:管帽为红色标记的离心管,内壁粗糙,未添加抗凝剂等化学试剂,制备富自体CGF纤维蛋白凝胶;中文摘要B组:管帽为白色标记的离心管,内壁光滑,未添加抗凝剂等化学试剂,制备的富自体CGF纤维蛋白液室温静置20min后变成松散的凝胶;C组:管帽为绿色标记的离心管,添加肝素钠抗凝剂,制备富自体CGF纤维蛋白液。2.2CGF制备分别采用A、B、C三组离心管,采取每位志愿者前臂静脉血27ml,每只离心管9ml,注满后勿摇动。

7、立即放入Medifuge离心制造机,按预定程序制备CGF。各获得:A组:富自体CGF纤维蛋白凝胶五份;B组:富自体CGF纤维蛋白液五份;C组:富自体CGF纤维蛋白液五份。3检测前样本制备3.1富自体CGF纤维蛋白凝胶(液体)的液态处理A组:将富自体CGF纤维蛋白凝胶(去除底端红色凝胶部分),移入玻璃匀浆器,冰浴条件下,缓慢研磨成匀浆,匀浆液在4℃条件下,以3000r/min的速度离心5min,留取上清液待测;B组:将富自体CGF纤维蛋白液室温静置20min后变成的松散凝胶移入玻璃匀浆器,冰浴条件下,缓慢研磨成匀浆,匀浆液在4

8、。C条件下,以3000r/min的速度离心5min,留取上清液待测;C组:吸出富自体CGF纤维蛋白液直接移入5ml离心管内待测。3.2样本稀释检测前对检测样本以0.01mol/L的PBS缓冲液做如下稀释:检测IGF.1及BMP.2时,将三组样本各稀释50倍;检测VEGF.A及EGF时,将三

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