家蚕肠道短小芽孢杆菌sw41脂肪酶基因的克隆、表达及酶活性分析

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1、西弗．虫学二零一四届硕士学位论文家蚕肠道短小芽孢杆菌SW41脂肪酶基因的克隆、表达及酶活性分析学科专业：研究方向：指导教师：研究生：微生物学应用微生物万永继教授范蕊中国·重庆2014年5月DissertationforMaster’SDegreeofSouthwestUniversity,ChinaCloning，expressionandenzymaticanalysisoflipasegenefromBombyxmoriintestinalbacterium，BacilluspumillusSW41Major：MicrobiologyField：AppliedMicrobiologyA

2、dvisor：Prof．WanYongjiCandidate：FanRuiChongqing。ChinaMay,2014独创性声明学位论文题目：塞查题道复』二苤孢盘萱S巡垒!监应鳖基固煎直．隆二盍达及堕活性佥盘本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中引用他人已经发表或出版过的研究成果，文中已加了特别标注。对本研究及学位论文撰写曾做出贡献的老师、朋友、同仁在文中作了明确说明并表示衷心感谢。学位论文作者：热、签字日期：沙，v年f月Z一旷日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件

3、和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生院(筹)可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书，本论文：口不保密，口保密期限至年月止)。学位论文作者签名：僦u、导师签名：签字日期：沙／许j月了铷签字日期：沙7厂年舌月多日目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．IAbstract．．．．．．⋯．⋯．．．．．．．⋯．．．．⋯．⋯．．⋯．．⋯．．．．．．．．．⋯．⋯．．．．．．．．．．．．⋯．⋯．．．．⋯．．⋯．．．．．．⋯．．．

4、．．．．⋯．⋯．．．．．⋯．II】[第一章文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．11．1微生物脂肪酶研究简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．11．1．1脂肪酶及其来源⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．1．2微生物脂肪酶的结构特点及酶学特性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21．1．3脂肪酶的分子生物学研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41．1．4细菌脂肪酶的分类⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51．1．5家蚕肠道产脂肪酶细菌的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．2脂肪酶的应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯8113脂肪酶与核型多角体病毒⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91．3．1核型多角体病毒病简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91．3．2蚕的脂肪酶对家蚕核型多角体病毒抑制作用的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯．101．4家蚕抗病性及微生态制剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一111．4．1家蚕核型多角体病毒抗病性及品种选育的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．111．4．2家蚕肠道微生态及饲用生物添加剂的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．12．第二章引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯152．1研究背景及意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．152．2研究内容

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．162．3技术路线：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．17第三章短小芽孢杆菌SW41脂肪酶基因Lipase的克隆及生物信息学分析⋯⋯⋯193．1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．193．1．1载体及菌株⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯193．1，2主要试剂及配方⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯193．1．3实验仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯203．1．4序列分析相关软件及工具⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯203．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．203．2．1短小芽孢杆菌SW41基因组DNA的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯203．2．2脂肪酶基因Lipase的引物合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．213．2．3脂肪酶基因Lipase的PCR扩增⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯213．2．4目的基因片段回收⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．22西南大学硕士学位论文3-2．5目的基因片段与PMD．19T载体的连接⋯⋯⋯⋯