寒地苹果种质资源rapd分子标记与其核心种质初步构建

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1、独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：(刁始砖签字目期．叼年多月f留日关于论文使用授权的说明本人完全了解吉林农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存

2、、汇编学位论文。同意吉林农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。学位论文作者签名：导师签名：豳影砘／吼签字日期：年Z月-勺日年Z月厝日叼叼，r影吉林农业大学硕士学位论文寒地苹果种质资霖R^PD分子标记及其核心种质初步构建1前言苹果，是落叶果树中主要栽培树种之一，也是世界果树栽培面积较广，产量较多的树种之--[”。寒地苹果具有风味独特，品质佳，种质抗寒性、抗病性强的特点，是宝贵的种质资源财富，但长期以来，由于缺乏优良品种，制约了寒地苹果的进一步发展12J。如何发挥我国北方得天独厚的寒地苹果资源优势，进一步开展育种工

3、作，将有助于我国寒地苹果生产走在世界前列。而加强寒地苹果种质资源的整理。科学的评价，筛选核心种质和优异种质，并对这些种质资源进行全面的分析和鉴定，无疑是更好地利用寒地苹果种质资源的重要的基础工作。植物遗传资源是新种质选育的基础，种质资源的收集、评价和利用显得非常重要。然而庞大的种质资源不利于优良种质的保存和利用，据报道，全球作物种质资源已达450万份I”。由Frankel和Brownl4】发展起来的核心种质学说很好地解决了这一问题，并在许多物种广泛应用。但在植物上应用的主要是草本植物，木本植物核心种质的构建只有零星报道。木本植物由于多数为多年

4、生，个体占用土地面积较大，特别是对于果树而言又不能用种子保存种质，且组培苗容易发生遗传变异，因此核心种质的构建尤为重要，正逐步发展成为国际植物种质资源研究的热点。分子标记在种质资源的研究中起着举足轻重的作用，是分子辅助育种和构建核心种质的重要工具。当前分子标记主要有四种类型：形态标记、细胞学标记、生化标记和DNA分子标记，前三种标记是以基因表达的结果为基础，是对基因的间接反映，而DNA分子标记具有能取各个发育时期的个体、组织、器官甚至细胞作检测，既不受环境影响，也不受基因是否表达的限制。目前DNA分子标记技术已广泛应用于植物种质资源遗传多样性

5、的检测、植物品种鉴定和分类、遗传图谱的构建和进行基因定位以及育种材料的早期选择等。在这些DNA分子标记中RAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNA，RAPD)技术标记的DNA的多态性较其他分子标记丰富，而且结果稳定，操作方便，己被广泛用于动、植物的种质资源研究。国外在葡萄、桃、樱桃、苹果、柑橘等果树上进行种质资源的研究效果很好，证实该方法是目前评价果树种质资源的首选方法I叫，但在国内报道较少。本试验对寒地苹果RAPD分子标记扩增条件进行优化，并应用分子标记技术对266份种质材料进行标记，科学地评价我国寒地苹果种质资源

6、，初步构建核心种质，在现有的研究基础上，为加强寒地苹果种质资源的整理，科学的评价和更有效的利用，促进寒地苹果基因组研究水平的提高。吉林农业大学硕士学位论文寒地苹果种质资露R,tP0分子标记及其核心种质初步构建1．1寒地苹果种质资源研究进展种质资源是以种子、茎块和植株为载体而蕴藏的遗传物质的统称，是改良农作物的基因来源，也是生物遗传研究的重要物质基础【101。种质资源的保存和利用，对选育高产、优质、抗逆、抗病新品种具有重要意义，也直接关系到农业的可持续发展，种质资源一旦丢失，人类将无法再仓Ⅱ造其中的基因。果树种质资源的研究，包括收集、保存、分类

7、、整理及性状鉴定、评价利用等，日益受到广泛的关注。其内容和研究目的也日益拓宽，从为生产提供优良品种及砧木，到为现代育种目标提供优异种质基因。研究特点和趋向也发生较大变化，从栽培品种，扩展到野生、半野生和近缘野生种；从农艺性状描述，深入到表达这些性状的内在机制；从田间宏观观察到实验室微观研究。同时，作为信息社会的先进工具，也成为果树种质资源信息管理的重要手段。1．1．1寒地果树种质资源研究进展中国幅员辽阔，气候复杂，果树的分布从南到北随着气候的变化有很大的差别。果树原产地不同而形成内在种质的差异，造成了种质资源的抗寒性差异fJ¨。在中国北部约占

8、国土面积的三分之一地带称作寒地，此地带划分以年平均气温7．812的等温线为界，在此线以北为寒地。由于冬季气候寒冷，这里的果树都具有抗寒特性，称其为寒地果树【12j。