右美托咪定对小鼠缺血再灌注损伤肺chop凋亡通路的干预

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2、．．．．．．．．．．．．．．．．．．．2英文摘要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4前言．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯．⋯6材料和方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18分析与讨论．．．．．．．．．．⋯．⋯．．．．．．．．⋯．⋯⋯⋯39结论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43小结．．．

3、．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43参考文献．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47致谢．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯50参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．55声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯58万方数据温州I医科大学硕士学位论文缩略词表万方数据温州医科大学硕士学位论文右美托眯定对小鼠缺血／再灌注损伤

4、肺CHOP凋亡通路的干预摘要目的：探索右美托咪定对小鼠缺血／再灌注损伤肺C／EBP同源蛋白(C／EBPhomologousprotein，CHOP)凋亡通路的干预作用。方法：采用40只SPF级雄性8．10周龄C57BL／6J小鼠，体重18-229，复制在体原位左肺I／R损伤模型。实验随机分4组为(n=10)：假手术组(sham组)，缺血／再灌注损伤模型组(I／R组)，I／IH生理盐水(NS组)，I瓜+右美托咪定预处理组(DEX组)。I／R组小鼠经氯胺酮(100mg／kg)+赛拉嗪(10mg／l(g)腹腔注射复合麻醉

5、后，仰卧位固定小鼠，进行气管切开插管，连接小鼠呼吸机，进行机械通气。经左2～3肋间行胸廓切开术进入左胸，开胸后暴露并游离左肺门，夹闭左肺门缺血30min，松开动脉夹再灌注180min。sham组仅开胸游离肺门而不夹闭，肺门游离后机械通气210min；DEX组在左肺缺血前30min腹腔注射DEX25l-tg／kg，NS组则给予与DEX同体积的生理盐水。实验灌注期结束，取出左肺组织，按需保存。测定肺组织干湿比值(1ungwetweighttodryweightratio，W／D)、总肺含水量(totallungwate

6、rcontent，TLw)，评估肺组织损伤指数(theindexofquantitativeassessmentofhistologicallung．IQA)。TUNEL方法检测肺组织细胞的凋亡指数(apoptosisindex，AI)，Westernblot和逆转录PCR(reversetranslatePCR，RT．PCR)分别检测各组肺组织内CHOP(C／EBPhomologousprotein，CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(glucoseregulatedproteinofmolecularweight7

7、8kDa，grp78)蛋白和mRNA变化趋势。结果：l、肺组织湿干重比(W／D)、总肺水含量(TLW)：与sham组比，其余各组肺W／D、TLW指标明显上升(尸0．05)；DEX预处理组W仍及TLw较I／R组和NS组明显下降(P<0．01)。2、肺组织形态学观察：sham组对比，其余各组肺组织结构破坏迹象明显，肺组织损伤指数(IQA)上升(尸<0．01)：DEX组较I／R组和NS组明显改善，IQA明显下降(P<0．01)。3、肺组织超

8、微结构观察：sham组肺组织微绒毛、板层小体及线粒体等结构相对完整，I／R组和NS组内微绒毛明显脱落，板层小体空泡化显著，线粒体水肿；DEX组板层小体形态较完整，空泡化明显减轻，线粒体形态相对完好。万方数据温州医科大学硕士学位论文4、AI：sham组凋亡较弱，其余各组凋亡显著(P<0．01)，DEX组凋亡较I／R组和NS组显著减轻(尸