基于常规提取法与超高压技术优化金翘热毒清提取工艺的研究

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1、南方医科大学2011级硕士学位论文基于常规提取法与超高压技术优化金翘热毒清提取工艺的研究BaSedOnCOnVentlOnaleX仃aCtlOnmetnOdandODtlmlZatlOnO士1^'．●●．●●．●^Ultr咖gnpreSSUreeXtraCtlOn1)rOCeSSO士JlnqlaOKeCIuqlng1·1’1．●⋯●‘一●■课题来源：广州市科技计划重大民生攻关专项学位申请人导师姓名专业名称培养类型培养层次所在学院答辩委员会主席答辩委员会委员叶陈丽张忠义主任药师药剂学学术学位型硕士南方医科大学珠江医院刘叔文教

2、授杨敏主任药师陈吉生主任药师张军主任药师张守尧主任药师2014年5月23日广州硕士学位论文基于常规提取法与超高压技术优化金翘热毒清提取工艺的研究硕士研究生：叶陈丽指导教师：张忠义主任药师摘要金翘热毒清颗粒主要由大青叶、金银花、连翘、生石膏、荆芥、薄荷、钩藤、蝉衣、玄参、芦根、前胡、霍香、神曲、淡竹叶、甘草共15味中药组成，主要功能为疏风解表、清热解毒、利咽止咳，主治感冒发热、咽喉肿痛、扁桃体发炎等上呼吸道感染，主要针对外感风热或温病初起导致的发热、微恶风、头痛、口渴、咽喉充血痛疼、乳蛾肿痛等现代之风热型急性上呼吸道感染。该

3、制剂于1991年取得“医院制剂批文”，开始在我院生产和使用，在临床应用期间疗效显著，安全性高，经济效益好，欲将其开发成中药6类新药。前期研究结果初步显示，金翘热毒清颗粒循常规合煎工艺(12、8、8倍水煎煮三次，时间分别为1．5、1、1小时)，君药金银花、连翘的有效成分绿原酸和连翘酯苷A提取率较低。要实现处方中有效成分的提取分离，同时保证工艺的稳定可重复性，是目前面临的关键技术问题。因此，有必要对金翘热毒清颗粒的提取工艺作进一步的探讨研究。首先，绿原酸和连翘酯苷A皆属热敏成分，在高温条件下不稳定，主要由于绿原酸是由咖啡酸与奎

4、尼酸形成的酯，其分子结构中有酯键、不饱和双键及多元酚三个不稳定部分；连翘酯苷A为苯乙醇咖啡酸类化合物，分子结构中具有酯键和糖苷键，高温时易分解产生咖啡酸、D．葡萄糖、L．鼠李糖和一次级苷。其次，钩藤的主要有效成分是生物碱，如：钩藤碱、异钩藤碱等，复方合煎时金翘热毒清中钩藤生物碱可能影响绿原酸的提取，降低绿原酸保留率。目前，常用的提取方法(如回流提取法、索氏提取法、冷浸提取法、渗漉摘要提取法、水蒸气蒸馏法等)仍存在损失大，能耗高，溶剂消耗大，周期长，工序多，提取率低，有效成分提取不明确等问题。因此，在不降低有效成分生理活性的

5、基础上，力求寻找一种快速、高效提取出活性高、质量稳定的有效成分的方法。而超高压提取技术则是最近几年才出现的一种全新的低温提取技术，其工作原理是先将药材粉碎与提取介质混合放入密闭容器中，迅速升高压力至100MPa以上，保压1～10min，快速卸压。在超高压提取过程中，由于压力较高，大大加快了浸润过程和溶质扩散过程，使药材毛细孔内快速充满溶剂，提高了有效成分的传质速度。其特点是提取时间短，提取效率高，能耗低(一次性加压、一次性添加溶剂即可)．，杂质含量少，提取工艺简单，无环境污染，且机械化程度高，特别适用于热敏成分的提取研究。

6、因此，本研究拟针对金翘热毒清合煎工艺时绿原酸和连翘酯苷A提取率低的情况，首先探讨绿原酸、连翘酯苷A提取率低的原因，并应用常温超高压提取技术提高绿原酸、连翘酯苷A的提取率，探讨解决金翘热毒清提取工艺存在的问题，为进一步的实验研究提供基础。目的：探讨金翘热毒清中绿原酸、连翘酯苷A提取率低的原因，并应用超高压技术提高绿原酸和连翘酯苷A的提取率，探讨解决金翘热毒清提取工艺中存在的问题。方法：1、探讨绿原酸、连翘酯苷A提取率低的原因(1)考察煎煮温度对绿原酸、连翘酯苷A提取率的影响，分别以绿原酸、连翘酯苷A的含量为指标，采用HPLC

7、测定金银花药材温浸液和煎煮液、以及连翘药材温浸液和煎煮液中的含量；(2)考察pH、煎煮时间、钩藤合煎对绿原酸含量的影响，测定金银花单煎液、钩藤单煎液、以及金银花和钩藤合煎液中绿原酸的含量并进行比较；(3)考察钩藤碱对照品对绿原酸含量的影响，测定绿原酸对照品单煎、绿原酸对照品和钩藤碱对照品合煎后的绿原酸的含量。最后，采用SPSS13．0软件对测定结果进行分析。2、应用超高压技术分别提取绿原酸、连翘酯苷A的工艺研究II硕士学位论文在单因素试验的基础上，采用三因素三水平Box．Bellllken实验设计分别对金银花中绿原酸、连翘

8、中连翘酯苷A的超高压提取工艺参数进行优选。分别以绿原酸、连翘酯苷A提取率为指标，考察浸泡时间、液固比、提取压力、提取时间等因素对提取工艺的影响。优选超高压提取法提取金银花中绿原酸、连翘中连翘酯苷A的最佳工艺，并与回流提取、超声提取和水煎煮法进行比较。3、优化超高压提取金翘热毒清的最佳工艺研究采用Box．