人工养殖菲牛蛭（poecilobdella manillensis lesson，1842）菌性疾病的研究

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1、中山大学硕士学位论文人工养殖菲牛蛭（PoecilobdellamanillensisLesson，1842）菌性疾病的研究姓名：李浩华申请学位级别：硕士专业：水生生物学指导教师：吕军仪20070528人工养殖菲牛蛭(PoecilobdellamanillensisLesson，1842)细菌性疾病的研究专业：水生生物学硕士生：李浩华指导教师：吕军仪摘要本文对菲牛蛭(Poecilobdellamanillensis)在工厂化养殖条件下发生疾病的病原菌的形态、生理生化特性、对多种药物的敏感性、防治方

2、法以及病蛭组织的显微病理变化进行了研究。从患病的菲牛蛭腐烂处深层肌肉分离病原菌，得到6株优势菌，编号为0601、0602、0603、0604、0605、0606。通过对以上六株菌的菌落和菌体形态观察、初步生理生化特征分析，菌株0601、0603、0605的形态特征一致，菌株0602、0604、0606的形态特征一致，取菌株0601、0602作为实验用菌。经人工感染试验，0601号菌液浓度为108CFU／ml、107CFU／ml、106CFU／ml、105CnI／ml时的肌注感染死亡率分别为100

3、％、100％、60％、30*,6。0602号菌液浓度为108CFU／ml、107CFU／ml、106CFU／ml、105CFU／ml时的肌注感染死亡率分别为100％、80％、50％、30％。再次感染分离得到2株菌，编号为0607和0608，肌注感染感染发病率均为1000,6。且初次感染与再次感染菲牛蛭发病症状与自然发病症状基本一致。这两株菌的理化特性指标与自然发病的水蛭中分离到的菌株0601、0602一致。因此确定0601、0602号菌株为致病菌。通过对菌株的菌落和菌体形态观察、生理生化特征以及

4、16SrRNA基因序列分析，结果表明0601号细菌为嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)，0602号细菌为奇异变形杆菌(Protuesmirabilis)。该病可由这两种菌单独或共同引发。药物敏感和治疗试验表明，两株病原菌均对氨曲南、新霉素、环丙沙星等药敏感。甩板蓝根和三黄药浴治疗效果较好，治愈率可达800／'0左右。组织病理观察表明，患部皮肤表皮角质层溃烂、脱落；肌肉发生溃疡、腐烂，肌纤维断裂、溶解、坏死；唾液腺排列混乱，部分出现断裂，表明这两种病原菌均具有较强的毒力。关键词

5、：菲牛蛭，奇异变形杆菌，嗜水气单胞菌，16SrRNA，组织学StudiesonthebacterialDiseaseofleech(PoecilobdellamanillensisLesson，1842)Major：HydrobiologyNalne：LiHaohuaSupervisor：Pro．LvJunyiABSTRACTTIlisthesisdescribedthemorphological．physiologicalandbiochemicalcharacteristicsandsens

6、itivitytodrugsofpathogenicbacteriaofthediseaseinleeckSixstrainsnamed0601，0602，0603，0604，0605and0606wereisolatedfromtherottenmuscleoftheillleeehs．Accordingtotheanalyzingresultstothesesixstrainsinmorphological仃aits，physlologkalandbiochemicalreactions，0

7、601，0603，0605strainswereconfirmedthesamebacteriumand0602，0604，0606strainsweretheotherbacterium．Experimentsofartificialinfectiontestshadbeendoneandtheresultsshowedthat0601．0602strainscouldcausediseaseanddeathforleech．Therefore,0601，0602strainswereprov

8、edtobepathogenicbacteria．BasedOllthemorphologicaltraits,physiologicalandbiochemicalreactionsandmolecularidentification(16SrRNA)，0601stainwasidentifiedtobeAeromonashydrophila,and0602strainwasProtuesmirabilis．Bothofthe0601and0602strainshadbeendemonstra