菲牛蛭（hirudinaria manillensis lesson，1842）养殖生态学、生化成分及其抗凝活性研究

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1、中山大学博士学位论文菲牛蛭（HirudinariamanillensisLesson，1842）养殖生态学、生化成分及其抗凝活性研究姓名：张彬申请学位级别：博士专业：水生生物学指导教师：吕军仪20080524中文摘要菲牛蛭(砌“枷缈砌m口聆f耽咒s括Lesson，1842)养殖生态学、生化成分及其抗凝活性研究专业：水生生物学博士生：张彬指导教师：吕军仪教授菲牛蛭(劢，．谢b柳恸m册ff比瑚括Lesson)隶属无吻蛭目，是一种珍贵的医用水蛭。本论文主要对我国华南地区菲牛蛭养殖生态学、生化成分及其抗凝血酶活性进行了研究。在

2、菲牛蛭繁育过程中，密度、季节、温度、体重、年龄和应激刺激等因素能对菲牛蛭亲本的性腺发育和繁殖效率产生重要影响。本文研究了上述6个因子对亲蛭繁殖的影响。在季节和密度实验中，分为秋冬和春夏2个季节，分别设置4个(5、20、30和50尾／箱(0．05m3土层))和7个密度梯度(5、10、15、20、25、30和50尾／箱(0．05m3土层))；结果表明在不同季节下，产茧率、产茧数、孵化率和孵化数等繁殖指标有明显差异，其中，春夏季节孵化时间短于秋冬季节，而产茧数和孵化数高于秋冬季节；当繁殖密度为5．10居箱时，亲蛭的繁殖效率最

3、高，当繁殖密度为50尾／箱时，亲蛭的繁殖效率最低，而且亲蛭死亡率高，具有明显抑制作用。在交配和卵茧孵化实验中，首先研究温度对水体和土壤中生活菲牛蛭交配率的影响，设置7个温度梯度(室温、24，26，28，30，32和34℃)；结果表明菲牛蛭在土壤中的交配率要明显高于水体环境，其最佳交配温度是28．30℃；另外研究茧重和温度对菲牛蛭卵茧孵化的影响，设置茧重处理5组(小于0．69，0．6·1．Og，1．O-1．59，1．5—2．09，大于2．Og)和孵化温度处理6组(22，24，26，28，30和32℃)；结果表明茧重1．O

4、．2．0g时具有最高孵化数和孵化率，最适孵化温度为26．28℃。在体重、年龄和应激刺激实验中，设置亲蛭体重处理3组(5-10g、10一15g和15—20g)，蛭龄处理3组(8月龄、2年龄、3年龄和4年龄)中山大学博士学位论文张彬和应激处理3组(操作应激1次、2次和3次)；结果表明10．15g亲蛭具有最高的性腺系数和繁殖效率，2．3年龄亲蛭具有最佳的产茧数和产茧率，繁殖过程中适宜的应激刺激(1．2次)能促进亲蛭产茧，提高繁殖效率。商品菲牛蛭养殖过程中，研究了3种微生态制剂对菲牛蛭养殖水体的净化效果，几种中草药和抗生素制剂

5、对菲牛蛭细菌性疾病治疗作用和3种常用水产消毒剂对菲牛蛭的急性毒性作用。在水体净化实验中，设置硝化细菌、光合细菌和EM．复合菌3个处理，结果表明3种微生态制剂在15天内均能较好的稳定水体pH，增加溶解氧Do含量，明显降低coD、Ⅻ吖．N和N02。．N，并大大提高菲牛蛭成活率，其中以EM复合茵效果最佳。疾病治疗实验中，设置5种中草药(板蓝根、陈皮、穿心莲、三黄和车前草)和3种抗生素制剂(诺氟沙星、环丙沙星和土霉素)，结果表明5种中药制剂中板蓝根治疗效果最好，陈皮的治疗效果次之，三黄和车前草有一定治疗效果，而穿心莲无治疗效果

6、，且对菲牛蛭有一定的毒害作用；同时证明诺氟沙星、环丙沙星和土霉素等3种抗生素药物对菲牛蛭细菌性疾病均具有很好治疗效果。急性毒性实验中，设置3种消毒剂(强力碘、杀菌水和灭毒威)，实验结果表明菲牛蛭对3种消毒剂药物的敏感性依次为：强力碘>灭毒威>杀菌水，杀菌水是菲牛蛭较理想的疾病防治药物，灭毒威使用时要准确掌握用量，菲牛蛭对强力碘极为敏感，不宜作为其疾病防治的药物。幼蛭培育过程中重点对其人工饲料进行研究，同时探讨了密度、温度、饵料、季节、初始体重、孵化温度、饵料组合及其投喂频率等因子对幼蛭摄食、生长和成活的影响。在诱食剂筛

7、选实验中，设置10个处理(精氨酸、甘氨酸、L．丙氨酸、甜菜碱、腺苷酸、鸟苷酸和尿苷酸及其4种复合制剂)，结果表明3种氨基酸、鸟苷酸和尿苷酸促摄作用显著，而腺苷酸、甜菜碱和3种复合制剂无诱食作用。探讨饲料中5种添加营养成分和不同浓度柠檬酸对幼蛭培育效果时，设置黄芪、三黄、板蓝根、EM复合菌和利多酶等5种成分和O．1，O．2，O．3和0．4％的柠檬酸，结果表明5种饲料均能明显改善幼蛭摄食，增加摄食量，提高摄食效率，促进幼蛭生长，提高其成活率，其中以复合酶利多酶和益生茵EM复合菌效果最佳；同时饲料中添加0．1．O．2％柠檬酸

8、，能显著刺激菲牛蛭幼蛭摄食，促进幼蛭生长，提高成活率。饵料组合及其投喂频率对幼蛭培育影响实验中，天然饵料设置6个处理(16，12，8，6，4和3次／120天)，人工饲料设置5个处理(16，12，8，6和4次／120天)，并比较人工饲料、天然饵料及其组合投喂下幼蛭培育效果；Ⅱ中文摘要实验结果表明天然饵料最佳投喂频率为1次／15d，人