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时间:2019-02-26
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1、中山大学硕士学位论文人工养殖菲牛蛭(PoecilobdellamanillensisLesson,1842)菌性疾病的研究姓名:李浩华申请学位级别:硕士专业:水生生物学指导教师:吕军仪20070528人工养殖菲牛蛭(PoecilobdellamanillensisLesson,1842)细菌性疾病的研究专业:水生生物学硕士生:李浩华指导教师:吕军仪摘要本文对菲牛蛭(Poecilobdellamanillensis)在工厂化养殖条件下发生疾病的病原菌的形态、生理生化特性、对多种药物的敏感性、防治方
2、法以及病蛭组织的显微病理变化进行了研究。从患病的菲牛蛭腐烂处深层肌肉分离病原菌,得到6株优势菌,编号为0601、0602、0603、0604、0605、0606。通过对以上六株菌的菌落和菌体形态观察、初步生理生化特征分析,菌株0601、0603、0605的形态特征一致,菌株0602、0604、0606的形态特征一致,取菌株0601、0602作为实验用菌。经人工感染试验,0601号菌液浓度为108CFU/ml、107CFU/ml、106CFU/ml、105CnI/ml时的肌注感染死亡率分别为100
3、%、100%、60%、30*,6。0602号菌液浓度为108CFU/ml、107CFU/ml、106CFU/ml、105CFU/ml时的肌注感染死亡率分别为100%、80%、50%、30%。再次感染分离得到2株菌,编号为0607和0608,肌注感染感染发病率均为1000,6。且初次感染与再次感染菲牛蛭发病症状与自然发病症状基本一致。这两株菌的理化特性指标与自然发病的水蛭中分离到的菌株0601、0602一致。因此确定0601、0602号菌株为致病菌。通过对菌株的菌落和菌体形态观察、生理生化特征以及
4、16SrRNA基因序列分析,结果表明0601号细菌为嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila),0602号细菌为奇异变形杆菌(Protuesmirabilis)。该病可由这两种菌单独或共同引发。药物敏感和治疗试验表明,两株病原菌均对氨曲南、新霉素、环丙沙星等药敏感。甩板蓝根和三黄药浴治疗效果较好,治愈率可达800/'0左右。组织病理观察表明,患部皮肤表皮角质层溃烂、脱落;肌肉发生溃疡、腐烂,肌纤维断裂、溶解、坏死;唾液腺排列混乱,部分出现断裂,表明这两种病原菌均具有较强的毒力。关键词
5、:菲牛蛭,奇异变形杆菌,嗜水气单胞菌,16SrRNA,组织学StudiesonthebacterialDiseaseofleech(PoecilobdellamanillensisLesson,1842)Major:HydrobiologyNalne:LiHaohuaSupervisor:Pro.LvJunyiABSTRACTTIlisthesisdescribedthemorphological.physiologicalandbiochemicalcharacteristicsandsens
6、itivitytodrugsofpathogenicbacteriaofthediseaseinleeckSixstrainsnamed0601,0602,0603,0604,0605and0606wereisolatedfromtherottenmuscleoftheillleeehs.Accordingtotheanalyzingresultstothesesixstrainsinmorphological仃aits,physlologkalandbiochemicalreactions,0
7、601,0603,0605strainswereconfirmedthesamebacteriumand0602,0604,0606strainsweretheotherbacterium.Experimentsofartificialinfectiontestshadbeendoneandtheresultsshowedthat0601.0602strainscouldcausediseaseanddeathforleech.Therefore,0601,0602strainswereprov
8、edtobepathogenicbacteria.BasedOllthemorphologicaltraits,physiologicalandbiochemicalreactionsandmolecularidentification(16SrRNA),0601stainwasidentifiedtobeAeromonashydrophila,and0602strainwasProtuesmirabilis.Bothofthe0601and0602strainshadbeendemonstra
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