重组p16蛋白在大肠杆菌中的表达纯化及其功能研究

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1、万方数据·88·重组P16蛋白在大肠杆菌中的表达纯化及其功能研究江晖白静史忠诚傅松滨【摘要】目的在原核细胞中表达P16蛋白并纯化，研究外源性P16蛋白对肿瘤细胞周期的影响。方法构建外源性P16融合蛋白的原核表达载体pQE3l-p16。眦诱导大肠杆菌B也l菌株表达P16融合蛋白，通过亲和层析柱纯化目的蛋白，经westem-blot鉴定后，将P16蛋白转导人人肺腺癌细胞系A549中，利用免疫细胞化学方法对蛋白进行细胞内定位，同时绘制细胞生长曲线，并用流式细胞仪分析细胞周期的变化。结果所构建P16融合蛋白的原

2、核表达载体pQE31-p16，可在大肠杆菌中稳定表达，通过纯化获得P16融合蛋白。利用lip如ctarni鹏“2000转染试剂可将P16蛋白转入A549细胞中，生长曲线与流式细胞术结果显示P16蛋白可抑制肿瘤细胞增殖。结论原核细胞表达的P16蛋白经纯化，转导进入A549细胞，可影响其生长周期，抑制A549细胞的增殖。【关键词】P16；融合蛋白；细胞周期StudyontheF衄et氩哑ofE】甲降ssi蚰衄dPur墒∞tion0fR啪bi脚tP16Protdnin晟瑚脚胁五1，戤，西191，S砸劢伽g-砒

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8、1，哈尔滨医科大学医学遗传学教研室(江晖、白静、史忠诚、傅松滨)；150081哈尔滨，黑龙江省生物工程省部共建重点实验室(傅松滨)通讯作者：傅松滨，白静(E-蛐Iil：fIlsb@哪．hrbmu．edu．cn；嘲iIIg@e啦．hIb咖．edu．cn)·论著·万方数据垦匿遗佳堂基麦垫塑生!旦!!旦筮垫鲞筮!翅坠』鲤生坚，垫鲤：坠垫，坠21992年，Olopade等⋯发现恶性黑色素瘤细胞系9号染色体(9p21)缺失，缺失率高达50％。1993