乙肝病毒感染产妇血清及乳汁中病毒核酸及抗体检测研究

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1、乙肝病毒感染产妇血清及乳汁中病毒核酸及抗体检测研究【摘要】目的探讨乙肝病毒感染产妇血清及乳汁中病毒核酸与抗体检测方法。方法选取乙肝病毒携带产妇92例，采用ELISA检测法对产妇血清及乳汁中乙肝标志物进行测定，并采用荧光定量多聚酶链式反应法对血清以及乳汁中的HBV-DNA含量进行测定。结果92例患者中大三阳24例(26.09%),小三阳36例(39.13%),HBsAg以及HBcAb阳性32例(34.78%)o各组患者乳汁HBV-DNA阳性率均低于血清检出率，但是差别并不明显(P>0.05)o大三阳组患者血清、乳汁HBV-DNA检出率明显高于其他两组，且其

2、病毒载量明显高于其他两组(PV0.05)。且随着血清病毒载量的升高，乳汁病毒载量也相应升高，两者成正相关(r=0.853,P<0.05)o结论乙肝病毒感染产妇进行母乳喂养应各位谨慎。条件允许时可以对血清以及乳汁中病毒核酸进行检测以确定喂养方式，如果条件不允许，则应放弃母乳喂养。【关键词】乙肝；病毒感染；血清；乳汁；核酸检测；病毒检测乙肝是我国常见的传染性疾病，母婴途径是其重要的传播方式。作为婴儿最为理想的食物，母乳是否具有传播乙肝病毒的作用目前还存在着一定的争议，有研究认为约有(30-50)%的乙肝病毒慢性携带者由母婴途径引起［1］。本研究通过对92例血

3、清HBV-Ag阳性的孕产妇血清及乳汁病毒核酸进行检测和分析，现报告如下：1资料与方法1.1临床资料选取2007年1月-2011年11月期间我院收治的乙肝病毒携带产妇92例，年龄(28-43)岁，平均(29.17±3.82)岁；孕(37-41)周，平均(39.16±0.42)周。所有孕产妇均为单胎妊娠，且为第一次妊娠。胎儿体重(2100-4500)g,平均(3273.73±637.26)go所有产妇均未见明显的临床症状，丙氨酸氨基转移酶(0-40)U/Lo采用Child-pugh法对肝功能进行分级［2］,A级13例，B级39例，C级40例。剖宫产37例，自

4、然分娩53例，阴道助产2例。1.2方法采用ELISA检测法对产妇血清及乳汁中乙肝标志物进行测定，并采用荧光定量多聚酶链式反应法对血清以及乳汁中的HBV-DNA含量进行测定。于产妇分娩前采取清晨空腹外周血3ml,放置lOmin后以6000r/min进行离心lOmin。取50ul放入Eppendorf管，并加入50ulDNA提取液充分打匀，放入100°C干式恒温器lOmin,然后进行lOmin离心，转速为10000r7min。取5ul行PCR检测。产妇分娩3d后收集3ml初乳，以10000r/min进行离心lOmin,去除上层油脂后吸取100ul下层乳汁放入

5、无菌微量离心管，加入lOOullOOg/L聚乙二醇液混匀，并在4°C下进行10000r/min离心15min,抛弃上清液。加入50ul灭菌双蒸水，将沉淀进行充分溶解，并加入DNA提取液，充分混匀。将上述标本放置于冰箱以4匸冷藏过夜，然后吸取750ul乳汁注入Eppendorf管进行ELISA检测和HBV-DNA定量检测。1.3统计学处理采用SPSS13.0软件进行分析，计量资料采用t检验，计数资料采用x2检验，且以P<0.05为有统计学意义。2结果2.1ELISA检测结果92例患者中大三阳24例(26.09%),小三阳36例(39.13%),HBsAg以

6、及HBcAb阳性32例(34.78%)。1.2HBV-DNA检测各组患者乳汁HBV-DNA阳性率均低于血清检出率，但是差别并不明显(P>0.05)o大三阳组患者血清、乳汁HBV-DNA检出率明显高于其他两组，且其病毒载量明显高于其他两组(P<0.05)o且随着血清病毒载量的升高,乳汁病毒载量也相应升高，两者成正相关(r=0.853,P<0.05),见表lo3讨论乙型肝炎是一种严重危害人类健康的全球性疾病，在我国乙肝病毒携带率高达(10-15)%,每年更是有超过百万的乙肝病毒携带者分娩，母婴传播是乙肝病毒进行传播的重要途径。母乳中不仅富含优质蛋白、乳糖、维

7、生素以及饱和脂肪酸，而且可以有效提高婴儿抵抗力，促进其健康成长［3］。但是乙肝表面抗原阳性产妇是否可以进行母乳喂养一直以来都存在着较大的争议。乙肝病毒核酸是病毒具有传染性的最为直接的标志，其拷贝数量直接衡量着传染性的强弱，也是衡量治疗效果的重要指标［4］。本研究中乳汁HBV-DNA的检出率略低于血清，但是差异并不明显。大三阳患者血清以及乳汁病毒核酸载量明显高于其他患者，且乳汁病毒核酸载量随着血清载量的升高而升高。这些都说明，乙肝病毒携带患者其体内HBV仍然处于较为活跃的复制期，在这种情况下，产妇进行母乳喂养应各位谨慎。条件允许时可以对血清以及乳汁中病毒核

8、酸进行检测以确定喂养方式，如果条件不允许，则应放弃母乳喂养。参考文献［1］曾定元