血管生成素-1对血管内皮细胞[mg2+]i增加机制的实验研究

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1、遵义医学院硕士学位论文血管生成素--1对血管内皮细胞[Mg2+]i增加机制的实验研究姓名：王智峰申请学位级别：硕士专业：药理学指导教师：梁文波；洪炳哲201205遵义医学院硕士学位论文目录血管生成素一1对血管内皮细胞[M92+】；增加机制的实验研究摘要目的：探讨在血管生成素-1(Ang-1)的作用下，人脐带静脉内皮细胞(HUVEC)内游离镁离子浓度([M92+]i)升高的调节机制。方法：使用荧光指示弃lJmag．fura．2．AM，运用离子荧光法动态检测人脐带静脉内皮细胞内的游离镁离子浓度。结果：Ang—l诱导的内皮细胞[M92+]；

2、增加与细胞外镁离子浓度无关。Ang一1诱导的内皮细胞[M92+]，增加与细胞内钙离子浓度无关。经酪氨酸激酶阻断剂(tryrphostinA23和genistein)，磷脂酰3激酶阻断剂(wortmannin和LY294002)预处理，均可明显阻断Ang一1诱导的内皮细胞[Mf+]；增加。但经活化丝裂原激活激酶阻断剂(SB202190和PD98059)预处理，则不能阻断Ang一1诱导的[M92+]；增加。结论：Ang一1经酪氨酸激酶／磷脂酰3激酶信号转导途径使细胞内的镁离子库释放镁离子，从而增加人脐带静脉内皮细胞的[M92+]i。关键词

3、：Ang．1；M92+；酪氨酸激酶；磷脂酰3激酶遵义医学院硕士学位论文目录Angiopoietin．IincreasesintracellularfreeM92+bytyrosinekinase／P13KinHUVECsAbstractobjective：ThemechanismofAngiopoietin．1(Ang．1)inmediatingincreaseofintracellularfreemagnesium([M92+]i)inhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVECs)wereinv

4、estigatedinthisstudy．Methods：Thechangesof[M92+]iinHUVECswerequantitativelydetectedinintracellularcationmeasurementsystemloadedwiththefluorescentmagnesiumindicatormag-tiara-2．Results：Ang一1increased[M92+】i，andtherewasnotanysignificantdifferenceamongthegroupsof0mmol／Land1m

5、mol／LofextracellularM92+；similarresultswereobtainedingroupsdonewithCa2+。Pretreatmentwithtyrosinekinaseinhibitors(tyrphostinA23andgenistein)，phosphatidylinositol3-kinase(P13KJinhibitors(wortmanninandLY294002)blockedtheincreaseof[M92+】iinducedbyAng．1，mitogen．activatedprot

6、einkinaseinhibitors(SB202190andPD98059)hadnoeffectontheAng．1-induced[M92+]iincrease．Conclusion：TheseresultssuggestthatAng一1increase[M92+]iviainducedM92+releasefromintracellularM92+pools，whichismediatedbytyrosinekinase／P13K．dependentsignalingpathways．KeyWords：Angiopoieti

7、nl；M92+；tyrosinekinase；P13K2IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII英文缩略词表

8、!

9、!!姒一一^_^_缩略词英文全称中文全称⋯’-。。。·。Ang--1Angiopoietin--1血管生成素．1HUVECHumanUmbilicalVeinEndothelialCells脐静脉内皮细胞TKAMFBSPBSKDRtyrosinekinaseacetoxymethyl酪氨酸激酶乙酰氧基甲酯fetalbovineserum胎牛血清PhosphateBufferedSaliner

10、eceptortyrosinekinase磷酸盐缓冲液受体酪氨酸激酶遵义医学院硕士学位论文目录．^L—-‘一月lJ舌镁离子(M92+)为人体细胞内含量最多的二价阳离子。正常血清镁离子的浓度为O．75mmol／L一1．25