流行我国的弓形虫分离株基因分型及其毒力研究

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1、目录中英文缩略词对照表…………………………………………………1中文摘要………………………………………………………………2英文摘要………………………………………………………………51.前言…………………………………………………………………92.材料与方法…………………………………………………………122.1材料和试剂……………………………………………………122.1.1实验动物和虫株……………………………………………122.1.2引物…………………………………………………………132.1.3主要试剂……………

2、………………………………………152.1.4部分试剂的配制……………………………………………152.1.5主要仪器及来源……………………………………………172.2实验方法………………………………………………………182.2.1弓形虫CAg检测……………………………………………182.2.2弓形虫IgM检测……………………………………………182.2.3弓形虫IgG检测……………………………………………192.2.4弓形虫间接血凝试验………………………………………202.2.5人源性弓形虫分离…………………

3、………………………202.2.6猫源性弓形虫分离…………………………………………202.2.7弓形虫复苏与冻存…………………………………………222.2.8弓形虫DNA提取…………………………………………232.2.9弓形虫目的基因扩增………………………………………252.2.10PCR产物的纯化……………………………………………322.2.11PCR产物的酶切……………………………………………322.2.12弓形虫总RNA提取………………………………………352.2.13RNA浓度和纯度测定…………………

4、……………………3612.2.14逆转录合成第一链cDNA…………………………………362.2.15实时荧光定量PCR…………………………………………372.2.16TgCtwh6脑包囊分离和纯化………………………………372.2.17TgCtwh6在小鼠体内动态分布检测………………………382.2.18荧光定量PCR………………………………………………383.结果…………………………………………………………………393.1弓形虫病人资料………………………………………………393.2不同地区猫标本检测………

5、…………………………………393.3弓形虫基因型…………………………………………………403.4流行我国弓形虫小鼠毒力……………………………………453.5TgCtwh6在小鼠体内动态分布…………………………………463.6弓形虫毒力因子检测…………………………………………484.讨论…………………………………………………………………495.结论…………………………………………………………………53参考文献………………………………………………………………55附录一.个人简历……………………………………………

6、………61附录二.致谢…………………………………………………………62附录三.综述…………………………………………………………632中英文缩略词对照表英文缩写英文对照中文对照BLASTBasicLocalAlignmentSearchTool基于局部比对算法的搜索工具PCRPolymeraseChainReaction多聚酶链式反应dNTPDeoxyribonucleosidetriphosphate脱氧核糖三磷酸bpBasePair碱基对GAPDHGlyceraldehyde-3-phosphatedeh

7、ydrogenase三磷酸甘油醛脱氢酶mRNAMessengerRNA信使核糖核酸MWMolecularWeight分子量ODOpticalDensity光密度PBSPhosphateBuffer磷酸盐缓冲液ReverseTranscriptPolymeraseChainRT-PCR逆转录多聚酶链式反应ReactionRPMRevolutionperminute每分钟转数DNADeoxyribonucleicacid脱氧核糖核酸RFLPRestrictionfragmentlengthpolymorphis

8、m限制性片段长度多态性分析ROPRhoptryprotein棒状体蛋白GRADensegranuleprotein致密颗粒蛋白MICMicronemeprotein微线体蛋白EBEthidiumbromide溴化乙啶cDNAComplementaryDNA互补DNARCFRelativecentrifugalfield相对离心（力）场1流行我国的弓形虫分离株基因分型及其毒力研究硕士研究生王林导师沈继龙教授安徽医科