紫扇贝线粒体dna的初步研究

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时间:2019-02-25

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1、DNAofArgopectenpurpuratusQingdaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofAgronomyFengWei(DepartmentofAnimalScienceandVeterinaty)Suu"砌ngChundeSuDervJsor:eWaQingdao.ChinaJune,2012独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的

2、地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得青岛农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:葬弗时间:文口I≥年6月7细关于论文使用授权的说明本人完全了解青岛农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意青岛农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。(保密的学位论文在解密后应

3、遵守此协议)研究生签名:导师签名:时间:>们>年6月1自时间:o峪年乡月a伊干№捌旒青岛农业大学硕士学位论文摘要紫扇贝线粒体+DNA韵初步研究摘要本实验以引进的紫扇贝和海湾扇贝为亲本,建立了紫扇贝自交组合(ZZ)、海湾扇贝自交组合(HID、紫扇贝×海湾扇贝(ZH)和海湾扇贝×紫扇贝饵劢共4个实验组合。对紫扇贝j海湾扇贝及其杂交后代的线粒体进行研究。通过对紫扇贝12SrRNA、16SrRNA和COI片段的扩增测序,得到的线粒体片段分别为910bp、990bp和1504bp.与lO种扇贝建立进化树,结果表明紫扇贝与海湾扇贝的亲缘关系较近

4、。应用引物COIl=和COIR对紫扇贝的性腺和体细胞线粒体DNA进行PCR扩增,获得660bp长度的COI基因片段,应用引物Z001F/Z001R对紫扇贝的性腺和体细胞线粒体12S片段进行PCR扩增,获得544bp长度的12S基因片段。经过比对性腺与体细胞的COI和12S片段,发现性腺与体细胞COI基因及12S基因均为一个单倍型,即体内只有一种线粒体DNA类型,没有发现双单性遗传现象,雌、雄性腺的COI基因和12S基因片段变异率很低(0.45%和0.74%)。根据序列的差异设计各自的选择性引物:H001FPH001R.Z002F/Z

5、002R,前者在海湾扇贝中扩增出521bp片段,后者在紫扇贝中扩增出362bp的片段。同样可以用于杂交扇贝的鉴定。应用引物COIF和COIR对紫扇贝的性腺和体细胞线粒体DNA进行PCR扩增,获得660bp长度的COI基因片段,应用引物Z001F/Z001R对紫扇贝的性腺和体细胞线粒体12S片段进行PCR扩增,获得544bp长度的12S基因片段。经过比对性腺与体细胞的COI和12S片段,发现性腺与体细胞COI基因及12S基因均为一个单倍型,即体内只有一种线粒体DNA类型,没有发现双单性遗传现象,雌、雄性腺的COI基因和12S基因片段变

6、异率很低(0.45%和0.74%)。根据序列的差异设计各自的选择性引物:H001F/H001R,Z002F/Z002R,前者在海湾扇贝中扩增出521bp片段,后者在紫扇贝中扩增出362bp的片段。同样可以用于杂交扇贝的鉴定。关键词:紫扇贝;海湾扇贝;线粒体基因;杂交鉴定;双单性遗传青岛农业大学硕士学位论文AbstraetPrimaryStudy+onMitochondrial、DNAofAbstractThisexperimentfoucusontheimportedArgopectenpuratusandArgopectenirr

7、adians,launchaserialresearchontheirhybridizationgeneration.Twointer-specifichybrid.families(HZandZH)andtwoinbredfamilieswereconstructedusingthePeruvianscallop,Argopectenpurpuratusandthebayscallop,Argopecten·irradians.16SrRNAgene。fragmentsareamplifiedbyPCRrespectivelyfr

8、omArgopectenpurpuratusandArgopectenirradians.Comparingthesetwosequences,wedesignedthreepairsofselectiveprimersforthei

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