绒山羊绒毛生长相关基因的筛选、鉴定和多态性分析

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1、分类号S813.3学校代码10129UDC636学号08100005绒山羊绒毛生长相关基因的筛选、鉴定和多态性分析Selection,IdentificationandSNPAnalysisofCorrelationGeneswithCashmereGrowthonCashmereGoats申请人：刘斌学科门类：农学学科专业：动物遗传育种与繁殖研究方向：绒山羊分子数量遗传育种指导教师：李金泉教授论文提交日期：二〇一二年六月本研究由“国家绒毛用羊产业技术体系放牧营养调控岗位”（编号：CARS-40-12）、“内

2、蒙古自治区科技计划项目”（编号：20110718）和“内蒙古农牧业科学院青年创新基金项目”（编号：2009QNJJM04）资助TheworkwassupportedbyGrants-inProjectby―GrazingNutritionalRegulationPositionsofNationalHairSheepIndustrytechnologysystem‖(No.CARS-40-12),―InnerMongoliaAutonomousRegionScienceandTechnology‖(No.20

3、110718)andYouthInnovationFundforAcademyofAgricultureandStockbreedingSciencesofInnerMongoliaAutonomousRegion（No.2009QNJJM04）摘要绒山羊是重要的绒用经济动物，其绒毛生长具有较强的季节性，但不同品种之间有很大的差异，大多数绒山羊在非长绒季节（5-8月份）不长绒，而辽宁绒山羊一些品系可以常年长绒（6月开始长绒）。埋植褪黑激素可以促进绒山羊在非长绒季节长绒，从而达到四季长绒的目的。本研究以内蒙古白

4、绒山羊为主要研究对象，采用分子标记和基因芯片技术，从候选基因和差异表达基因筛选入手，研究绒山羊产绒经济性状的遗传多态性和非长绒季节埋植褪黑激素绒山羊皮肤组织差异表达基因，初步探讨促进绒山羊绒毛生长的因素及其分子调控机理。1、绒山羊内分泌激素类基因SNP分析应用PCR-SSCP和DNA测序技术，以内蒙古阿尔巴斯型、阿拉善型、二郎山型以及罕山白绒山羊4个品种（系）共456个样本为实验材料，分析PRL、PRLR、MLTR1a、MLTR1b、IGF-I和TG6个候选基因共16个位点的遗传多态性，结果表明：（1）在绒山

5、羊PRL基因Exon5区域P2引物位点存在X76049:g.576bp处C-A突变，该突变导致第176个密码子CCC变成ACC，从而使脯氨酸变成苏氨酸（Pro-Thr）,该位点SNP对绒山羊绒厚度存在显著影响(P＜0.01)，同时还对阿尔巴斯绒山羊产羔数存在边际显著影响(P=0.055)；在PRLR基因Exon10区域P3引物位点存在HQ266606:g.1076bp处T-C突变，该突变导致第359个密码子CTT变成CCT，从而使亮氨酸变成脯氨酸（Lue-Pro），该位点SNP对阿尔巴斯绒山羊羊绒细度存在显著

6、影响(P＜0.05)；（2）在绒山羊MLTR1b基因Exon2区域P8引物位点存在NM_001206907:g.648bp处C-G突变，该突变没有导致氨基酸的改变，还存在NM_001206907:g.665bp处G-A，该突变导致第223个密码子CGC变成CAC，从而使精氨酸变成组氨酸(Arg-His)，该位点SNP对绒山羊产绒量有显著影响（P＜0.05）。同时，该多态位点基因型与年龄互作效应对绒山羊绒厚度有显著影响（P＜0.05）；MLTR1b基因Exon2区域P9引物位点存在NM_001206907:g.

7、1015bp处G-A突变，该突变导致第339个密码子GGC变成AGC，从而使甘氨酸变成丝氨酸(Gly-Ser)，该位点SNP与年龄互作效应对绒山羊绒细度存在边际显著影响（P=0.056）；这两个位点多态对绒山羊产羔数、羔羊初生重等繁殖性状均无显著影响（P＞0.05）（3）在绒山羊TG基因Exon9区域P14引物位点存在NM_173883:g.1895bp处C-T突变，该突变导致第632个密码子GCG变成GTG，从而使丙氨酸变成缬氨酸（Ala-Val）；在Exon11区域P16引物位点存在NM_173883:g

8、.2849bp处G-A突变，该突变导致第950个密码子CGC变成CAC，从而使精氨酸变成组氨酸（Arg-His）。这两个位点SNP对绒山羊体重、产羔数和产绒性状均无显著影响（P＞0.05）。2、绒山羊皮肤差异表达基因的筛选、鉴定和特征分析（1）通过基因芯片技术筛选绒山羊在非长绒期埋植MLT促进羊绒生长的相关基因。筛选出差异表达的基因95个，其中61个表达上调、34个下调。这些异常表达的基因按照功能分