植物雌激素α-玉米赤霉醇对骨髓间充质干细胞来源的成骨细胞的作用

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1、密级：学校代码:10075分类号：学号:20091386医学硕士学位论文植物雌激素α-玉米赤霉醇对骨髓间充质干细胞来源的成骨细胞的作用学位申请人：刘未华指导教师：段斐教授学位类别：医学硕士学科专业：药理学授予单位：河北大学答辩日期：二○一二年六月ClassifiedIndex:Code:10075U.D.C:NO:20091386ADissertationfortheDegreeofMedicalScienceEffectsofPhytoestrogenα-zeranolonosteoblastderivedfrombonemarrowmesench

2、ymalstemcellsCandidate:LiuWei-huaSupervisor:Prof.DuanFeiAcademicDegreeAppliedfor:MasterofMedicalScienceSpecialty:PharmacologyUniversity:HebeiUniversityDateofOralExamination:June,2012摘要摘要目的本研究利用植物雌激素α-玉米赤霉醇及雌激素受体拮抗剂，作用于大鼠成骨细胞，通过其分泌细胞因子的影响，来研究植物雌激素α-玉米赤霉醇对绝经后骨质疏松症防治作用的机制。方法-5-10通

3、过在成骨细胞培养体系中加入不同浓度的α-ZAL（10mol/L～10mol/L），利用Elisa法和半定量RT-PCR的方法，分别于24h、48h、72h检测α-ZAL对大鼠成骨细胞分泌OPG、IL-6、TNF-α的变化及其mRNA表达的影响。通过在成骨细胞培-6-5养体系中加入α-ZAL（10mol/L）与不同浓度的雌激素受体拮抗剂（10mol/L、-7-910mol/L、10mol/L），利用Elisa法和半定量RT-PCR的方法，分别于24h、48h、72h检测其对大鼠成骨细胞分泌OPG、IL-6、TNF-α的影响，及其72h对OPGmRNA表

4、达的影响。结果-5-101、、、不同浓度的、α-ZAL（10mol/L～10mol/L）作用于成骨细胞后，随着α-ZAL浓度的增加，作用时间的延长，OPG的分泌量及其mRNA的表达均有不同程度的增加，IL-6、TNF-α则有不同程度的降低。α-ZAL可促进成骨细胞OPG的分泌及其mRNA的表达，抑制IL-6、TNF-α的分泌及IL-6mRNA的表达。-6-5-7-92、、、α-ZAL（10mol/L）与不同浓度的雌激素受体拮抗剂（10mol/L、10mol/L10mol/L）作用于成骨细胞后，当α-ZAL单独作用时，OPG的分泌及其mRNA的表达量均

5、增加，IL-6、TNF-α的分泌量降低；当α-ZAL与雌激素受体拮抗剂共同作用时，OPG的分泌及其mRNA表达均有不同程度的降低，IL-6、TNF-α的分泌量均有不同程度的升高。结论1、α-ZAL具有类似雌激素的作用，能够刺激成骨细胞释放OPG，抑制破骨细胞的分化细胞因子IL-6、TNF-α的释放，从而降低破骨细胞的活力，抑制破骨细胞的分化与成熟，导致成骨细胞性骨形成能力增强和破骨细胞性骨吸收能力的下降。2、成骨细胞中OPG、IL-6、TNF-α的表达可被雌激素受体拮抗剂所阻断，这就提I摘要示α-ZAL对成骨细胞的作用是通过雌激素受体介导的。关键词α

6、-ZAL绝经后骨质疏松症成骨细胞破骨细胞骨保护素雌激素受体拮抗剂IIAbstractAbstractObjects：Thispaperisdiscussedabouttheinfluenceofplantestrogenalphazeranolandestrogenreceptorantagonisttoratosteoblastssecretecellsfactors,Studyofthemechanismofplantestrogenalphazeranolonpostmenopausalosteoporosispreventionandcure

7、function．Methods:1、Addthedifferentconcentrationofα-ZAL（10-5mol/L~10-10mol/L）inosteoblastculturesystem,useElisaandhalfquantitativeRT-PCRmethodtodetectthesecretionchangesandtheinfluenceofthemRNAexpressionofOPG,IL-6,TNF-alphaofratsosteoblast,respectivelyin24h,48h,72h．2、Addtheα-ZAL

8、（10-6mol/L）anddifferentconcentrationofestrogenreceptor