穿心莲内酯对胃癌sgc-7901细胞g22fm期的周期抑制与诱导线粒体途径凋亡的分析

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1、万方数据浙江大学硕二￡学位论文目录6穿心莲内酯可以促进细胞内Ros水平的上升⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯447细胞内ATP与GsH水平变化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．44第四章穿心莲内酯诱导sGc．7901细胞周期抑制与凋亡诱导的结论与讨论⋯⋯⋯⋯48参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．52创新点⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．54展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．!；5附录：英文缩写对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．56作者简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．57万方数据浙江大学硕士论文致谢匆匆那些年!用一部电影的片名来感叹这三年来的时光飞逝。在紫荆港里的学习生活，技能get，喜悦与悲伤，每一个感动的瞬间，这是青春的美好记忆；求学生涯的暂别，最难说出口的是——离别的不舍与无奈。师者，传道授业解惑也。首先要感谢我的导师龚兴国老师。在我的毕业论文的整个过程中，从立题，设计，实验进展都少不了我的导师

3、龚兴国研究员的悉心指导与敦促。龚老师生活上是一名仁师，学术上是一名严师。对待学术，他总是孜孜不倦，精益求精，对每一位同学严格要求，对待科学严谨求真，也正是由于他的这种态度与耐心的指导，我的实验才能顺利的完成。生活中，龚老师是慈父，对我们无微不至的关怀与包容，置身在这个课题组里有着家的舒适与温馨。当然，一个良好的环境少不了周围的师兄弟姐妹们的支持与帮助。感谢周亮老师、秦勇老师；戴维、唐鸿云、饶雄建、王或师兄、马妍，王宏伟师姐在实验中给我的经验指导，让我少走许多弯路。感谢王震，沈舒滢、张艺，聂颢，赵鑫等同学给我精神支持，

4、感谢他们在我实验失败的时候，生活失意的时候，给与我鼓励、陪伴、欢笑，衷心地感谢一路上有你们，我的生活不单调，不孤独。最后，还得感谢我的父母，儿行千里母担忧，从大学到研究生，陪伴你们的时间太少，其实心里最多的是感到愧疚。给你们添的乱，增的忧，都累积在你们的眉头与心头，然而给你带来的喜悦却总是那么少。在这里我只能用只言片语来表达我心中对你们由衷的感谢，感谢你们的养育之恩与包容之心。同时还要感谢我的姐姐们，谢谢你们对弟弟的期待与肯定。千言万语还来不及说!谢谢你们。刘奇章2015年5月于浙大紫金港万方数据浙江大学硕士论文摘要

5、穿心莲作为一种传统中草药主要用于治疗感冒咳嗽，发烧，喉炎和一些感染性疾病。近年来，人们发现其提取物中有一种活性成——穿心莲内酯，具有治疗多种疾病的功能，其中就包括对各种肿瘤细胞的杀伤作用。因此，在癌症的化疗上具有很好的潜在价值。胃癌是一种高发的恶性肿瘤疾病，好发年龄在50岁以上，男女比例为2：1。目前临床上对于胃癌治疗手段还只限于手术治疗，化疗和放射治疗；而且对于保守治疗化疗的药物治疗效果较差，因此找到新型的抗肿瘤药物或者联合用药具有重要意义。本研究重点是探索穿心莲内酯对胃癌细胞SGC一7901的生长是否抑制和作用机

6、理。细胞活力检测实验(MTT)表明：sGc．790l细胞在不同浓度处理24和48小时后，穿心莲内酯对肿瘤细胞具有浓度时间依赖的生长抑制效果；流式细胞技术检测到药物处理过后的细胞被抑制在G2／M期，并且伴有内源途径凋亡的发生；并发现细胞内的R0s水平上升和线粒体膜电位的下降现象。Hoechst33258染色进一步证明细胞凋亡的存在；蛋白免疫印迹法(westemblot)检测到周期与凋亡相关蛋白表达水平的变化；药物处理过后，胃癌细胞内的ArP以及GSH水平明显下调；NANDP补偿实验观察到细胞的周期抑制得到恢复，但是B．

7、萘黄酮预处理加强了穿心莲内酯对周期的抑制。p53蛋白表达量上调，与调控G2／M期的关键蛋白p—cdc2表达量上调、CycIinB1表达水平下调表明，穿心莲内酯对细胞的周期抑制的确发生在G2／M期，同时调控cdc2活性的蛋白cdc25与其活性调控蛋白C11l(2分别下调与上调表明穿心莲内酯造成的G2／M期抑制与DNA损伤有关；CleaVedCaLspaLSe一3，CleaVedCaSpaSe．9，和细II万方数据浙江大学硕士论文摘要胞色素c上调以及Bax的上调，Bcl．2的下调揭示穿心莲内酯同时诱导了细胞线粒体内源途径

8、的凋亡。细胞内GSH和ArP水平的下降与流式检测到的ROS水平上升和膜电位的崩溃一致，ROS消除剂NAC与NADPH预处理后，对药物造成的GSH和ATP下降有所恢复。此外NADPH的加入还恢复了周期抑制，下调了p53，p—cdc2与CyclinBl以及抑制了CleavedCaSpaSe一9，BaX的上调与Bcl—2的下调。这些说明穿心莲内酯诱导