白念珠菌感染kb细胞的il-6mrna及蛋白表达的实验研究

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1、白念珠茵感染KB细胞的IL．6mRNA及蛋白表达的实验研究计：学位论文：35页表格：3个插图：9幅李威指导教师：张虹教授申请学位级别：硕士学位论文提交日期：2012年4月学位授予单位：大连医科大学专业名称：口腔临床医学论文答辩日期：2012年5月学位授予日期：2012年6月评阅人：答辩委员会主席：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献

2、均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：垄筮签字日期：醴年』月上日关于学位论文使用授权的说明《白念珠菌感染KB细胞的IL一6mRNA及蛋白表达的实验研究》系本人在大连医科大学攻读(博士、硕士)学位期间在导师指导下完成的学位论文。本人及指导教师完全了解大连医科大学关于保存、使用学位论文的规定，同意学校保留并向有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版本，允许论文被查阅和借阅，同意学校将本论文加入：1．中国学术期刊(光盘版)电子杂志社——《中国博士学位论文全文数据库》、《中国优秀硕士学位论文全文数据库》及CNKI相关数据库。2．中国科学技术信息研究所——《中国学位

3、论文全文数据库》3．国家图书馆本人授权大连医科大学，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编学位论文，可以公布论文的全部或部分内容。论文作者签名：指导教师签名：垄重歹长缸签字日期：比年!月上日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(、一)刖舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(二)材料和方法⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2l(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·22三、综述⋯⋯⋯4DIIDD00⋯⋯⋯aOIID·i·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31四、附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯004DallP⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34五、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35白念珠茵感染KB细胞的lL-6mRNA及蛋白表达的实验研究硕士研究生：专旨导教师：指导小组：专业名称：李威张虹教授杨国玲教授口腔临床医学摘要目的：通过体外实验观察白念珠菌与KB细胞的黏附情况，探讨白念珠菌对口腔上皮细胞的黏附作用和影响因素，进一步分析白念珠菌的致病机制；应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和逆转录。聚合酶链反应(RT。PCR)分别检测白细胞介素一6(IL．6)在KB细胞中的蛋白和mRNA表达以及白念珠菌感染后对其表达的影响，探讨IL．6在口腔上皮细胞早期防御白念珠菌感染中的可能作用。方法：以口腔鳞癌细胞系KB细胞为研究对

6、象，观察白念珠菌感染KB细胞后，在不同的时间，白念珠菌的黏附总数、活力、及菌丝转换情况；分别以白念珠菌的菌丝相、孢子相和灭活的白念珠菌感染KB细胞，以单独培养的KB细胞作为对照组，分别在6h、12h、24h提取培养上清液，ELISA法检测上清液中IL一6的蛋白含量；RT．PCR法检测白念珠菌感染KB细胞后在24h时IL．6mRNA表达水平。结果：1．白念珠菌感染KB细胞后发生细胞黏附，24h内，随着时问的推移，被黏附的KB细胞数逐渐增多，孢子相和菌丝相白念珠菌均可黏附KB细胞。2．白念珠菌黏附KB细胞后，念珠菌仍保持其活性，但是随着时间的推移，游离态念珠菌的总数逐渐减少，从感

7、染3小时后的1．5×105calldidacells／cm2减少到24小时后的8×103calldidacells／cm2。3．白念珠菌感染KB细胞后，其形态从孢子相逐渐向菌丝相进行转换。并且随着时间的推移，菌丝的转换率逐渐升高，由3小时后的23．1％升高到24小时后的82．2％。差异有统计学意义(P