iex-1和cyclind1基因在甲状腺癌中的表达

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1、郑州大学硕士学位论文IEX--1和CyclinD1基因在甲状腺癌中的表达姓名:佘明聪申请学位级别:硕士专业:临床检验诊断学指导教师:秦东春201205摘要IEX-1和Cyc1.nDl基因在甲状腺癌中的表达硕士研究生佘明聪导师秦东春教授郑州大学第一附属医院检验科河南郑州450052摘要IEX-1(X-1的即刻早期反应基因),也称为IER3,p22/PRGl,DIF一2,或鼠源性gly96,是一种应激诱导的基因。它由两个外显子一个内含子构成,基因编码产物是由156个氨基酸组成的一个18kDa蛋白质,同时接受糖基化等多种翻译后修饰。该基因经荧光原位杂交法检测定位在染色体6p21.3

2、,在基因组数据库中它的序列与MHC基因座毗邻,尽管与其他已知的蛋白质缺乏显著的同源性,但是,人、大鼠、小鼠的IEX一1的同源性约73%。免疫组化染色显示,IEX一1蛋白在皮肤上皮细胞,气管,肠胃,泌尿生殖系统以及胰腺和乳房大量表达,另外该蛋白在大多数组织/器官的血管内皮细胞也表达相对较高的水平。这种在组织中的分布模式表明,IEX一1在应对外部环境和与上皮组织直接接触时所起的作用。CyclinDl蛋白是由CCNDl基因编码定位于1lq23的细胞周期正性调控因子。CyclinDl可以与CDK4/6形成复合物,使PRb磷酸化,释放出转录因子促使细胞周期从G1期向S期发展。Cycli

3、nDl的过度表达可以缩短细胞在G1期的时间,用微注射法将cyclinDl反义mRNA或单克隆cyclinDl抗体注入细胞后可阻止细胞进入S期,表明cyclinDl过表达可导致细胞生长失调及肿瘤的发生。在恶性肿瘤的发生发展分子机制中,肿瘤的增殖与凋亡具有重要的作用。国内目前对于甲状腺癌中IEX一1及cyclinDl基因的表达研究报道较少。目的:本实验拟在探讨IEX-1及cyclinDl因子在甲状腺癌、甲状腺良性结节及甲状腺正常组织中的表达,研究其在甲状腺癌发生发展中的作用,寻找新的甲状腺癌诊断方法;同时研究甲状腺癌患者IEX一1及cyclinDl基因表达与临床病理特征(性别、临

4、床病理类型、临床分期及有无淋巴结转移)的关系,为甲状腺摘要癌的诊断及治疗提供新的依据方法:1.采用RT-PCR技术对38例甲状腺癌组织、25例甲状腺良性结节组织及25例甲状腺正常组织中IEX-1及cyclinDlmRNA的表达进行检测。2.采用Westernblot技术对38例甲状腺癌组织、25例甲状腺良性结节组织及25例甲状腺正常组织中IEX—l及cyclinDl蛋白的表达进行检测。3.用SPSSl7.0统计软件进行统计学分析,定量资料用均数±标准差(z±D表示,呈正态分布的两组间比较用t检验,非正态分布的两组间比较采用非参数分析。两组以上均数比较用方差分析(ANVOA),

5、显著性水准Q=0.05。结果:1.IEX-1及cyclinDlmRNA在甲状腺癌组织中的表达1.1IEX-ImRNA在甲状腺组织中的表达:IEX-ImRNA在甲状腺癌组织中高表达,正常组织中弱阳性表达或者阴性表达,两组间存在显著差异(F=5.381,P

6、状腺癌组织中有淋巴结转移组织中的表达量大于无淋巴结转移者,两组间比较表达有显著性意义(F=3.350,PO.05)。1.2CyclinDlmRNA在甲状腺组织中的表达:CyclinDlmRNA在甲状腺癌中高表达,正常组织中弱阳性表达或者阴性表达,两组间存在显著差异(F=3.877,P

7、在显著差异(F=2.740,P

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