微生物转化法制备雄二烯二酮条件优化的研究

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1、四川师范大学硕士学位论文微生物转化法制备雄二烯-N条件优化的研究生物化学与分子生物学专业研究生汪静指导教师李维摘要雄甾．4．烯．3，17．二酮(简称：雄烯二酮或4．AD)和雄甾．1，4．二烯．3，17．二酮(简称：雄二烯二酮或ADD)是合成甾体类激素药物重要的中间体，多数甾体类药物都能以它们作为起始原料进行生产。本文对微生物降解法制备ADD进行了研究，主要开展了以下几个方面的研究：首先。比较分析了乙醇溶媒法、吐温80乳化法、超声波法等不同助溶方法及其组合处理胆固醇对其生物转化的影响，结果表明吐温．80结合超声波乳化处理底物，有利于底物的溶解和转化：构建了有机相．水相转化系统，增大底物

2、的投料浓度和解除产物的反馈抑制作用，从而提高了ADD的转化率；其次，研究了生长细胞生物转化的条件，确定了最佳转化条件为：初始pH7．0，温度30"12，接种量5％，底物浓度5g／L；最后，对静息细胞转化条件进行了优化．其最佳的两相系统是：有机相种类是邻苯二甲酸二辛脂，有机相所占比例为30％，投料量为5e,／L。在此条件下，ADD转化率提高了约3倍。Ⅱ四川师范大学硕士学位论文关键词：微生物转化，雄甾．禾烯．3，17．二酮，雄甾．1，4．二烯．3，17．二酮，双相系统，转化条件优化m四川师范大学硕士学位论文^·'‘1--‘‘‘一·‘-StUdies0Illthemicrobialtran

3、sformationOIcholesteroltoproduceandrost-1，4-dien-3，17-dioneMaior．BiochemistryandMolecularBiologyMastergraduate：WangJingTutor．Pmf．LiWeiAbstractlAndrology-4-em·3，17-dione(4一AD)arglandrosta-I，4一diene-3，17-dione(ADD)帆importantintermediatewhicharcwidelyusedhhormonaldrugsynthesis．Asanimportantinitial

4、mate眦theycansynthesizelotsofhormonalmedicine．Inthispaper,themicrobialtransformationofcholesteroltoproduceandmst-1，4-dien-3，17-dionebymeflJl_$ofthestrainGordouiaJ6hasbeenstudied，andtheresultsarcasfollows．Firstly,inordertoincreasethecholesteroldissolution,severalorganicsolventssuchasalcoholTween·

5、80wereusedassolubilizinggents，TheresultshowedthatsubstratesdissolvedinTween-80andfollowingwithultrasonicemulsificationwashelpfultOincma∞thesubstratedissolutionandconversionrate．Two-phasewater-organicsystemswasalsousedtO1tansformcholesteroltOproduceandrosta-I，4-diene·3，17-dione(ADD)，theresultssh

6、owedthatUseofbis(2-ethylhexyl)phthalateasorganicphase、懈foundsuitable旬rtlleabove．mentionedbiotransformation；IV四川师范大学硕士学位论文Secondly，theconditionsoftransformationusedgrowingbacterialceUwereoptimized，theywereaslblows：theinitialpHvalueis7，temperatureis30℃，andwith5％inoculation，5g／Lcomentrationofsubst

7、rate；A．tlast，theoptimalconditionsofcholesteroltransformationintwo．pbasesystembymeansofrestingcellswereinvestigated,theresunsshDwedthatusing30％DOPastheorganicphase，with59／Lsubs口疵co瞅ntration，theconversionrateofADDw豳improved3times．Ke