matrilin-2和肝卵圆细胞增殖关系及维生素k2对其影响实验的研究

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1、Matrilin．2与肝卵圆细胞增殖关系及维生素K2对其影响的实验研究摘要【目的】通过建立大鼠肝卵圆细胞(hepaticoval翻ls，HOc)增殖模型，探讨matrilill．2对HOc增殖分化调控作用及维生素K2(Ⅵt锄inK2，Ⅵ(2)对其的影响。进一步阐明肝内细胞外基质(extracellul盯matrix，ECM)成分在维持肝脏正常结构和细胞的增殖、分化、迁移方面具有的重要作用。在利用药物(如Ⅵ(2)促进内源性成体肝干细胞增殖、分化，加速肝再生，防治肝功能损害或衰竭等方面提供了一定的理论和应

2、用依据。【方法】将健康SPF级雄性SD大鼠随机分为五组：A．2．乙酰氨基芴组(2AAF组)、B．切肝组(HP组)、C．VK毫+切肝组即<2／】HP组)、D．2AAF+切肝组(2AAF／HP组)、E．2丸址+Ⅵ≈+切肝组(2丸虹+Ⅵ<2／HP组)，每组30只。各组分别给药后按改良的Solt-Farb盯大鼠模型构建方法将肝脏切除三分之二。于切肝术后第4、8、12、16、20天，共5个时间点手术取得大鼠肝脏，每组每个时间点5只，分别用甲醛固定及液氮保存，用于制作病理切片、免疫组织化学染色，以观察HOC增殖情

3、况，用荧光定量PCR方法检测各组肝组织中matril珏2mRNA的表达，并进行统计学分析。【结果】1．造模后大鼠一般情况：2儿心／HP组：术后活动减少、精神差，随后出现毛松无光泽、尿黄、腹水，4只大鼠死亡，死亡率13．3％，而2儿虹“，l(2／HP组无明显被毛松乱、尿黄，无腹水，2只大鼠死亡，死亡率6．7％。其它各组无特殊。2．形态学与组织学变化：2AAF／HP组：肝脏代偿性增大、充血、肝缘圆钝，表面及切面可见散在圆形点状病灶、不凸出肝表面，部分见出血点。镜下肝细胞水肿、肝索结构紊乱，汇管增生反应，H

4、OC呈簇状分布，随时间推移从汇管区向小叶中央迁移，术后20天结构基本恢复。2灿师+VK2／HP组：未见出血点及点状病灶，无腹水，汇管区增生更明显，分化、迁移加快，12天后已基本恢复正常。两组相同时间点ov-6阳性细胞计数2从F+Ⅵ㈣组较多，差异有统计学意义(Po．05)。3．荧光定量PcR检测matrilin．2ⅡlImA表达情况：各组均有一定量的表达，但以2丸心

5、／HP组及2从F岷／HP组最为明显，两组术后第4天、第8天matrilill-2删[斟A表达以2儿心+VK2／HP组较多，差异有统计学意义(p，o．05)，而从第12天起，两组表达量相当，差异无统计学意义(尸>o．05)，且高峰值相比，差异无统计学意义(尸>o．05)。同组内第4、8天与12天、第16、20天与12天差异有统计学意义(P

6、／HP组相关系数r=0．68，有统计学意义(氏O．05)。【结论】1．采用Solt-Farber方法成功建立了HOC增殖的2丸心／PH动物模型。2．Ma_trilin-2IIlIⅢA的表达与HOC增殖分化呈正相关关系，表明matrilin-2对HOC具有调控作用。3．维生素K2可通过增强Matriln2删[ⅢA表达，促进HoC增殖，加速肝脏再生，对肝脏有一定保护作用。4．阐明肝内ECM成分在维持肝脏正常结构和细胞增殖、分化、迁移方面具有重要作用，在利用药物(如VK2)促进内源性成体肝干细胞增殖、分化，

7、加速肝再生，防治肝功能损害或衰竭等方面提供了一定的理论和应用依据。【关键词】Ma倒咀in．2，肝卵圆细胞，维生素K2，细胞外基质，oV-62Experimental代searchonmatrilin-2associated而thoval∞llspmliflemtionandtheeffectsofvitaminK2onmart订lin．2andwalcensAbstl?act【objec如e】n哟ughtheratmodelofh印atic0valcellspr01if．盱ationt0explore

8、nle∞lcofm嘶1n2iIlo砌耐lsproli胁廿on孤ddi毹呦tiatio玛nleeff．ectSof诎aIlliIlK2∞martrilin．2锄dhepatic0valcells．Cl撕匆mee虢=ctSofcx协卜cellul盯matrix∞nomlalliv嚣snllc：t毗eandliv贸cells’proli触tioIl'锄1pli6edandi觚f．erentialiomProvideaⅡleoreticalb撕s矗)r璐ingd