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1、麦类作物学报2009,29(2):1892194JournalofTriticeaeCrops小麦WVp21基因表达载体的Gateway技术构建及其遗传转化31,222233高东尧,夏兰芹,徐兆师,马有志,李彦舫,原亚萍,221,4李连城,陈明,孙金海(1.吉林大学农学部畜牧兽医学院,吉林长春130062;2.中国农业科学院作物科学研究所/农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程/农业部作物遗传育种重点开放实验室,北京100081;3.吉林大学农学部植物科学学院,吉林长春130062;4.青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109)摘要:为了利用
2、中国特有的抗穗发芽小麦遗传资源,并深入分析Viviparous21(Vp21)基因在小麦穗发芽抗性中的作用,从抗穗发芽小麦品种西农979的干种子中分离了Vp21基因的同源基因,命名为WVp21。利用Gate2way技术,以植物表达载体pLeela为基础,成功构建了含有双35S启动子的高效表达载体,并转化拟南芥突变体abi324,获得了8株阳性植株。关键词:小麦;WVp21基因;克隆;转化中图分类号:S512.1;S330文献标识码:A文章编号:100921041(2009)022189206ConstructionandTransformationo
3、ftheExpressionVectorofWheatWVp21GeneUsingGatewayTechnology1,22223GAODong2yao,XIALan2qin,XUZhao2shi,MAYou2zhi,LIYan2fang,3221,4YUANYa2ping,LILian2cheng,CHENMing,SUNJin2hai(1.CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine,JilinUniversity,ChangChun,Jilin130062,China;2.NationalkeyFaci
4、lityforCropGeneResourcesandGeneticImprovement/KeyLabortoryofCropGeneticsandBreeding,MinistryofAgriculture/InstituteofCropSciences,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Beijing10081,China;3.CollegeofPlantScience,JilinUniversity,ChangChun,Jilin130062,China;4.CollegeofAnimalScience
5、andVeterinaryMedicine,QingdaoAgricultureUniversity,Qingdao,Shandong266109,China)Abstract:Pre2harvestsprouting(PHS)ofgrainwhileitisstillintheear,isduetoanearlydisruptionofseeddormancy.PHSreducesthequalityofwheatandthevalueofthegrain.Viviparous1(Vp21)homo2loguesplayanimportantrol
6、einseedmaturation,dormancyanddesiccation.Inthisstudy,tomakeuseofgeneticresourceofpre2harvestsproutingtoleranceinChinesewheats,PCR2basedapproachwasemployedtoisolateaVp21homologouscDNAclonefromXinong979,anddesignatedasWVp21.UsingGatewaycloningtechnology,theplantexpressionvectorof
7、WVp21genedrivenbythedouble35Spromoterwassuc2cessfullyconstructedandinducedintoArabidopsismutantabi324.8plantswithresistancetoBialaphoswereobtain.ThislaidabasisforthefunctionanalysisofWVp21gene.Keywords:Wheat;WheathomologousVp21gene(WVp21);Clone;Transformation[1][1]小麦穗发芽是一种世界性的自
8、然灾害。研究可能主要受种子休眠特性的影响。[2]表明,小麦穗发芽是受多基因控制的性状,种子休脱落酸(ABA)
