eif4e在急性髓细胞白血病中的表达研究

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1、目录eIF4E在急性髓细胞白血病中的表达研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31．3前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71．4材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯111．5结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··181．6讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．241．7结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯281．8参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯291．9英汉缩略词对照表⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯322致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33eIF4E及eIF4E相关性肿瘤的研究进展(综述)⋯⋯⋯⋯⋯34eIF4E在急性髓细胞白血病中的表达研究摘目的：1、通过RT．PCR法检测急性髓细胞白血病(AⅦ，)与非肿瘤对照者骨髓标本eIF4E的表达情况，比较eIF4E在AML与非肿瘤对照组之间的表达差异。2、检测AML诱导治疗前后elF4E表达情况，观察诱导治疗前后eⅢ4E表达差异。3、计算M4、M5型AML与其他亚型AMLelF4E表达情况，进一步比较不同亚型AML之间eIF4E表达的差异。4、统计AML基因突变的表达

3、情况，分析eIF4E表达与AML其他分子生物学异常的相互关系。方法：1、标本采集：采集初诊AML、诱导治疗达完全缓解AML及非肿瘤对照者骨髓标本，提取单个核细胞，加入TRIzol试剂充分裂解细胞，．80℃冷冻保存。AML诊断及疗效标准符合张之南《血液病诊断及疗效标准》。非肿瘤对照者纳入疾病包括免疫性血小板减少症、良性疾病导致的缺铁性贫血。2、实验分组：将初诊AML设为实验组，非肿瘤对照者设为对照组。将实验组能够耐受并同意化疗者进行常规诱导化疗，其中，非M3型AML化疗方案为DA(柔红霉素45．60mg／m2／dX3d、阿糖胞苷100．150mg／mE／dX7d)或

4、IDA(去甲氧柔红霉素8．12mg／m2／d×3d、阿糖胞苷100．150mg／m2／d×7d)标准诱导方案；M3型AML化疗方案为维甲酸+三氧化二砷(维甲酸20mg／m2／d口服至完全缓解、三氧化二砷O．16mg／kg／d静脉注射至完全缓解)双诱导方案，并根据个体情况加用蒽环类药物化疗。3、检测方法：根据人elF4E基因mRNA序列设计引物(NM00130679)，elF4E上游引物：5'-ACGGAATCTAATCAGGAGGT一3’，下游引物：5’．TTCCCACATAGGCTCAATAC．3’，扩增片段长度为246bp。根据人B．actin基因mRNA序列

5、设计引物(BC002409)，B—actin上游引物：5'-CTGGGACGACATGGAGAAAA．3’，下游引物：5f-AAGG从GGCTGGAAGAGTGC．3’，扩增片段长度为564bp。使用淋巴细胞分离液提取单个核细胞，使用TRIzol试剂等抽提RNA，并用AMV逆转录试剂盒进行逆转录，在聚合酶链式反应体系中分别加入B．actin、eIF4E引物进行聚合酶链式反应，使用琼脂糖凝胶电泳鉴定B．actill、eIF4E的表达。4、统计分析：根据所得实验数据进行统计分析，定量资料两组间比较采用t检验，定性资料两组间比较采用卡方检验，定性资料关联性分析采用卡方检

6、验。结果：1、本实验通过RT．PCR法检测AML骨髓标本eIF4E表达情况，测得55例初诊AML中36例eIF4E阳性表达，eIF4E阳性率为65．5％，经诱导治疗达完全缓解后3例AML骨髓细胞eIF4E由阳性转为阴性，非肿瘤对照者eIF4E全部阴性。2、18例M4、M5型AML中15例eIF4E阳性表达，eIF4E阳性率为83．3％，37例其他亚型AML中21例eIF4E阳性表达，eIF4E阳性率为56．8％，统计学分析提示M4、M5型AML与其他亚型AMLeIF4E表达无差异(胗O．05)。3、55例初诊AML中，4例FLT3／ITD基因突变阳性表达，统计学分

7、析提示eIF4E表达与FLT3／ITD基因突变表达无相关性(胗O．05)。结论：1、部分初诊AMLeIF4E高表达，诱导治疗达完全缓解后少部分AML骨髓细胞eIF4E表达水平下降。eIF4E表达水平有可能作为AML控制情况的一个检测指标。2、M4、M5型AML与其他亚型AMLeIF4E表达无差异。3、eIF4E表达与FLT3／ITD等分子指标表达相互独立，无相关性。关键词：eIF4E基因急性髓细胞白血病RT—PCRFLT3／ITDeIF4EexpressioninacutemyeloidleukemiaAbstract：Objectives：1．Todetecte

8、lF4Ee