angptl2与2型糖尿病动脉粥样硬化的关系及对huvec功能影响的研究

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1、万方数据中图分类号丝必。』UDC6』Q博士学位论文学校代码j立逊密级公珏Angp廿2与2型糖尿病动脉粥样硬化的关系及对HUVEC功能影响的研究RelationshipbetweenAngptl2andType2DiabetesAtherosclerosisandtheEffectsofAngptl2inHumanUmbiIicalVeinEndothelialCeUs作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：论文答辩日孟庆欣临床医学内分泌学湘雅医院钟惠菊教授期砷，蛳D日答辩委员会主席中南大学二O一四年五月万方数据学位论文原创性声

2、明本人郑重声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均己在论文中作了明确的说明。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。作者签名：童箧丛．日期：．2D丝年量月塑目学位论文版权使用授权书本学位论文作者和指导教师完全了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定：即学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件

3、和电子版；本人允许本学位论文被查阅和借阅；学校可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其它手段保存和汇编本学位论文。保密论文待解密后适应本声明。作者签名：童盘丝导IJ币巷名锹导师签名丝=翌日期：』龊年上月望日日期：塑士年上月卫日万方数据博士学位论文中文摘要Angptl2与2型糖尿病动脉粥样硬化的关系及对HUVEC功能影响的研究摘要第一部分血浆Angptl2水平与2型糖尿病及CA-IMT关系的研究目的：检测2型糖尿病患者血浆中Angptl2水平及颈动脉IMT的变化，探讨其与2型糖尿病及动脉粥样硬化的关系，分析

4、Angptl2与代谢相关指标的相关性，为阐明Angptl2对2型糖尿病动脉粥样硬化的影响提供依据。方法：选择50例健康对照人群(NC组)和99例2型糖尿组(DM组)，检测体重、血压、空腹血糖、空腹胰岛素、甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白，同时用高分辨率彩超检测双侧颈总动脉内．中膜厚度(IMT)，双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆Angptl2的水平，最后行数据整理及统计分析。结果：1．和正常对照组相比，2型糖尿病组血浆中Angptl2水平增高，并且和FPG线性相关；2．2型糖尿病组颈动脉IMT较正常对照组增厚，差异有

5、统计学意义；3．在2型糖尿病组和正常对照组人群中，颈动脉IMT和Angptl2均有相关性；4．行多元逐步回归分析虽示，血浆中Angptl2和HDL水平变化T万方数据博士学位论文中文摘要均是颈动脉IMT增厚的危险因素。结论：1．和正常对照组相比，2型糖尿病组的Angptl2增高，并且和FPG线性相关，提示血糖可影响Angptl2的水平；2．2型糖尿病组颈动脉IMT增厚，提示糖尿病可以加速动脉粥样硬化的进展；3Angptl2和颈动脉IMT正相关，并且是其影响因素，Angptl2可能有潜在致动脉粥样硬化作用。关键词：2型糖尿病，血管生成素样蛋白2，

6、颈动脉内膜中层厚度第二部分Angptl2在高糖诱导的内皮细胞凋亡中的作用目的：观察高浓度葡萄糖对人脐静脉内皮细胞凋亡及Angptl2表达的影响，初步探讨Angptl2是否参与葡萄糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡。方法：1．高糖对内皮细胞增殖的影响：HUVECs分别在在不同浓度梯度葡萄糖(5、10、20、30Mm)，在5mM和30mM葡萄糖条件下培养不同时间(4、8、12、24、48h)，以四甲基偶氮唑微量酶反应比色(MTT)检测细胞增殖；2．Angptl2水平的表达：HUVECs分别在不同浓度梯度葡萄糖(5、10、20、30Mm)以及25mM甘露

7、醇条件下培养48小时，以及在5I洲、30mM葡萄糖以及25mM甘露醇条件下培养不同时间(4、8、12、24、48h)，Westemblot检测Angptl2的表达变化：3．血管生成素样蛋白2载体的构建；万方数据博士学位论文中文摘要4．内皮细胞凋亡的检测：HUVEC分别在空载体组、30mM葡萄糖组、30mM葡萄糖+目的基因Angptl2组、目的基因Angptl2组、30mM葡萄糖+LY294002组、目的基因Angptl2+LY294002(P13K抑制剂)组培养48小时，以TUNEL法和Annexin．FITC／PI双染流式细胞术检测细胞凋亡

8、。结果：1．MTT实验结果显示细胞增殖与葡萄糖呈量效关系，HUVEC细胞在5mM浓度葡萄糖作用下细胞细胞增殖与30mM浓度葡萄糖作用下细胞细胞增殖有显著差异(P