neurod蛋白对小鼠急性放射性肠损伤治疗作用及作用机制的研究

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1、七年制专业学位论文NeuroD蛋白对小鼠急性放射性肠损论文题目伤治疗作用及作用机制的研究研究生姓名郑艳指导教师姓名曹建平专业名称临床医学研究方向放射生物学论文提交日期2012年5月10日学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签名：郑艳日期：20

2、12-05-14学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所（含万方数据电子出版社）、中国学术期刊（光盘版）电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文□本学位论文属在年月解密后适用本规定。非涉密论文□论文作者签名：郑艳

3、日期：2012-05-14导师签名：曹建平日期：2012-05-14NeuroD蛋白对小鼠急性放射性肠损伤治疗作用及作用机制的研究中文摘要中文摘要目的本研究通过观察NeuroD蛋白对小鼠急性放射性肠损伤的治疗作用，初步探讨其作用机制，为临床急性放射性肠损伤的防护与治疗提供新思路。方法动物模型制备及分组：雄性C57BL/6J小鼠11GyX射线全身照射，治疗组每只小鼠照射后30min腹腔注射给予1mgNeuroD蛋白，对照组每只小鼠照射后30min腹腔注射给予10µlEGFP。(1)采用病理切片HE染色，观察NeuroD蛋白对急性放射性肠粘膜

4、病理损伤的修复作用。(2)采用免疫组化法，观察NeuroD蛋白对肠道隐窝干细胞增殖分化能力的促进作用。(3)检测体重和存活率的变化，观察NeuroD蛋白整体救治效果。(4)采用PCR法，检测肠道islet-1mRNA的表达水平，初步探讨NeuroD蛋白急性放射性肠损伤治疗作用的机制。结果(1)NeuroD治疗组照射后84h肠粘膜未见出血，96h可见大量再生隐窝；EGFP对照组照射后84h肠粘膜损伤严重，绒毛脱落呈裸露，粘膜下层大片出血，96h未见再生隐窝。(2)NeuroD治疗组照射后96h隐窝基底部可见许多深棕色、淡棕色胞浆染色的阳性细

5、胞；EGFP对照组96h几乎未见阳性细胞。(3)NeuroD治疗组小鼠的体重和存活率较EGFP对照组无显著差别(p>0.05)。(4)NeuroD治疗组几乎未见肠道islet-1mRNA表达，目的条带不清楚，亮度极低，与EGFP对照组无明显差别。结论NeuroD蛋白可以促进急性放射性肠粘膜病理损伤的修复作用，提高肠道隐窝干细胞的增殖分化能力，但小鼠存活率并无显著提高。此外，NeuroD蛋白不通过激活肠道islet-1基因表达这条途径发挥治疗作用，具体机制待进一步探究。关键词NeuroD，隐窝干细胞，islet-1，放射性肠损伤作者：郑艳指

6、导教师：曹建平教授李明讲师IAbstractAstudyonthetherapeuticeffectandmechanismofNeuroDproteinonacuteradiation-inducedintestinalinjuryinmiceAstudyonthetherapeuticeffectandmechanismofNeuroDproteinonacuteradiation-inducedintestinalinjuryinmiceAbstractObjective:Inthisstudy,weobservethetherap

7、euticeffectofNeuroDproteininmicewithacuteradiation-inducedintestinalinjuryandtrytofindoutitsmechanism,inordertoprovidenewideasforthepreventionandtreatmentofclinicalacuteradiation-inducedintestinalinjury.Methods:Preparationandgroupingofanimalmodels:MaleC57BL/6Jmicewith11Gy

8、Xraytotalbodyirradiation,thetreatmentgroup,eachmousewasinjectedintraperitoneally1mgNeuroDprotein