骨碎补柚皮苷和三七总苷对人牙周膜细胞分化和超微结构的影响

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1、重庆医科大学硕士学位论文骨碎补柚皮苷和三七总苷对人牙周膜细胞分化和超微结构的影响姓名：吴静申请学位级别：硕士专业：口腔临床医学指导教师：向学熔201205重庆医科大学硕士研究生学位论文骨碎补柚皮苷和三七总皂苷对人牙周膜细胞分化和超微结构的影响摘要目的研究骨碎补柚皮苷和三七总皂苷作用于人牙周膜细胞后，细胞分化和超微结构的影响，为进一步探讨其对人牙周膜细胞的作用提供实验基础。方法(1)体外分离培养人牙周膜细胞，运用组织块法；观察原代培养的人牙周膜细胞和传代培养的人牙周膜细胞形态特征，免疫组化检测细胞表面标志物，对人牙周膜细胞进行鉴定；(2)采用MTT法检测不同浓度骨碎补

2、柚皮苷、三七总皂苷、骨碎补柚皮苷和三七总皂苷联合作用于人牙周膜细胞后，细胞增殖情况；(3)采用酶动力法检测骨碎补柚皮苷、三七总皂苷、骨碎补柚皮苷和三七总皂苷联合作用于人牙周膜细胞后，碱性磷酸酶活性的变化；(4)采用Westemblot法检测骨碎补柚皮苷、三七总皂苷、骨碎补柚皮苷和三七总皂苷联合作用于人牙周膜细胞后，细胞碱性磷酸酶表达；(5)观察骨碎补柚皮苷、三七总皂苷、骨碎补柚皮苷和三七总皂苷联合作用于人牙周膜细胞后超微结构的变化运用透射电镜。结果(1)组织块法培养所得细胞经过表型免疫组化鉴定：波形丝蛋白在人牙周膜细胞内表达阳性，角蛋白在人牙周膜细胞内表达阴性。(2

3、)实验组细胞增殖显著高于对照组，骨碎补柚皮苷增殖最明显重庆医科大学硕士研究生学位论文的质量浓度为1mg．L～，三七总皂苷以1mg．L。1质量浓度下增殖最明显，骨碎补柚皮苷和三七总皂苷联合作用后，较其余药物组增殖明显。(3)骨碎补柚皮苷、三七总皂苷、骨碎补柚皮苷联合三七总皂苷均能促进碱性磷酸酶活性增强，活性作用增强最明显为骨碎补柚皮苷联合三七总皂苷组。(4)骨碎补柚皮苷、三七总皂苷、骨碎补柚皮苷联合三七总皂苷作用于人牙周膜细胞后，碱性磷酸酶表达优于对照组，表达作用最明显为两药联合用药组。(5)骨碎补柚皮苷、三七总皂苷、骨碎补柚皮苷和三七总皂苷联合作用下，核糖体、粗面内

4、质网较对照组明显增多，联合用药组最明显。结论骨碎补柚皮苷和三七总皂苷联合作用于人牙周膜细胞，对其成骨分化和超微结构具有协同作用。关键词：人牙周膜细胞；骨碎补柚皮苷；三七总皂苷；分化；超微结构EFFECToFDRYNARIAFoRTUNEINARINGINCoMBINEDWITHPANAXNoToGINSENGSAPoNINSONTHEDIFFERENTIA，TIONANDUIJRA．STRUCTUREOFHUMANPERIoDONTALLIGAMENTCELLSABSTRCTobjectiVeToeVeluatethee虢ctsofD拶n撕afon_uIleinar

5、ingincombinedwithPanaxnotoginsengsap01linsonthedi船rentiationa11dul订a。stuctureofhumanperiodontalligamentcellsMethods(1)111roughtissue-culturemethod，pmamycultureandidenti矽thehumanpe打odontallig锄entcellsbyimmu．unohistichemicalme廿10d．(2)MTTmethodwasdetectedtoobservetheproliferationofllPDLCs

6、witllthee毹ctsofdi虢rentconcentrationsofD巧n撕afOrtuIlein撕ngin，Panaxnotoginsengs印oninsandtlleconlbination．(3)EnzymekineticsmethodwasadaptedtoiIlVestigatemeeffectofDIynariafortunein撕ngin，Panaxnotoginsengsaponins，combin撕onofD巧nadafIortuneinaringinandPanaxnotoginsengsaponinsonmeau(aliIlephosp

7、hataseactiV时ofIlPDLCs．(4)Westemblotwasusedtodetecttheexpressionofalkalinephosphatase．(5)TraJlsmissionelec仃onmicroscopewasusedtostudymeultra-s廿uctureofhPDLCswiththee虢ctsofD1ynariafonunein撕ngin，Panaxnotogillsengsaponins，combinationofD巧n撕afbrcunein撕nginaIldPanaxnotoginsengsaponins4Resul