高压氧对新生大鼠缺氧缺血脑损伤后24h内脑细胞线粒体膜电势的影响

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1、分类号⋯⋯⋯⋯⋯UDC⋯⋯⋯⋯⋯密级⋯⋯⋯⋯⋯编号⋯⋯⋯⋯⋯十I初大学CENTRALSOUTHUNIVERSITY硕士学位论又论文题目：高压氧对新生大鼠缺氧缺血脑损伤后24h内脑细胞线粒体膜电势的影响学科、专业：研究生姓名：导师姓名及其专业技术职务：罗娅丽黑明燕副教授J¨、／JJ、、、IqJ]／＼J^中南大学二。一二年五月分类号VDC硕士学位论文密级高压氧对新生大鼠缺氧缺血脑损伤后24h内脑细胞线粒体膜电势的影响InfluenceofHyperbaricOxyginationtotheMitochondrialMembranePot

2、entialin24HoursafterHypoxicIschemicBrainDamageinNeonatalSDRats作者姓名：学科专业：罗娅丽儿科学学院(系、所)：湘雅三医院指导教师：黑明燕副教授论文答辩日期望!!：兰：三!答辩委员会主席中南大学呲眦1吣7眦4眦7㈣9哪!㈣2哪Y原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表货撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我工作的

3、同志对本研究所作的贡献均己在论文中作了明确的说明。作者签名：l罗鱼即学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：叟堕垒!导师签蕊期：旦年—￡月兰L日硕士学位论文中文摘要摘要目的：围产期缺氧缺血(hypoxic—ische

4、mic，HI)是导致新生儿脑细胞损伤的主要原因之一。高压氧(hyperbaricoxygen，HBO)是临床上治疗缺氧缺血性脑损伤(hypoxic．ischemicbraindamage，HIBD)的方法之一，但其作用机制尚不完全明了。线粒体是所有细胞内制造能量的细胞器，线粒体膜电势(MitochondiralMembranePotential，AWm)是线粒体功能的标志，在m损伤早期即发生变化。本研究的目的，是应用新生大鼠HIBD模型并模拟临床HBO治疗，通过观察HIBD损伤后24小时内脑皮质AWm的变化，了解HBO对HIBD损伤

5、后脑皮质细胞AWm的影响，探讨HBO是否是通过改善脑皮质细胞AWm和改善其线粒体功能而治疗HIBD。方法：将7日龄新生SD大鼠132只随机分为正常对照组，HIBD组及HIBD+HBO组(后两组按Rice法制作新生大鼠HIBD模型，大脑左侧为损伤侧)，HBO+HIBD组动物在HI后立即给予HBO治疗，HBO结束的时间点记为0h点。动物按照处死时间点再分为0h，2h，4h，6h，12h，24h亚组(各组n=10)。各组动物断头处死后，制备脑皮质细胞悬液，给予AWm标记物罗丹明123(Rodaminel23，Rh0123)孵育，用流式细胞

6、仪检测Rh0123的平均荧光强度(meanfluorescencelevel，MFL)、并以该MFL为AWm，分别记录各组左右侧大脑皮质Aq-'m绝对值和损伤侧／损伤对倾UAWm比值。结果：1．正常对照组：左侧甲m为(4．72士0．12)MFL，左侧／右侧△甲m比值为(1．20土0．05)。2．HIBD组与正常组比较：HI后0h，2h，4h，6h，12h，24h各亚组左侧△甲m均低于正常组，分别为(2．67+0．53)、(3．92土2．59)、(4．21士0．38)、(3．58土0．50)、(4．16土0．14)、(3．42士0．3

7、4)MFL，其中0h亚组与正常组比较差异具有统计学意义(尸

8、h，6h，12h，24h各亚组左侧△甲m分别为(2．58+1．06)、(4．03+1．77)、(4．53+0．43)、(4．684-1．76)、(3．85+0．06)、(3．09+0．48)MFL。其中0h、24h亚组与正常组比较，差