雷帕霉素在紫杉醇抑制胃癌细胞增殖中的协同作用及其对胃癌细胞hif-1α、vegf表达的影响

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1、徐州医学院硕士学位论文雷帕霉素在紫杉醇抑制胃癌细胞增殖中的协同作用及其对胃癌细胞HIF--1α、VEGF表达的影响姓名：孔姝婧申请学位级别：硕士专业：肿瘤学指导教师：高超2012-03徐州医学院硕士学位论文雷帕霉素在紫杉醇抑制胃癌细胞增殖中的协同作用及其对胃癌细胞HIF．10【、VEGF表达的影响中文摘要目的观察雷帕霉素在紫杉醇抑制胃癌细胞增殖中的协同作用及其对胃癌细胞株中HIF．1C【、VEGF表达的影响，探讨雷帕霉素对胃癌细胞株SGC．7901生长和增殖影响的机制。方法体外培养胃癌细胞株SGC一7901，采用MTT比色法观察应用不同浓度的雷帕霉素对胃癌细胞株的

2、生长抑制作用：体外培养胃癌细胞株SGC．7901，采用MTT比色法观察雷帕霉素和(或)紫杉醇对胃癌细胞株的增殖抑制作用；采用RT-PCR法检测雷帕霉素作用后胃癌细胞株SGC．7901的HIF．1c【、VEGFmIⅢA的表达；采用Westemblot法检测雷帕霉素作用后胃癌细胞株SGC一7901的HIF．10【、VEGF蛋白的表达；结果1．MTT法观察到雷帕霉素可抑制人胃癌SGC．790l细胞增殖，抑制率随药物浓度的增加呈上升趋势，最大抑制率在药物浓度为160ng／ml时可达(31．51±0．79)％，各实验组分别与对照组比较差异均有显著性，5n∥ml组与10n∥m

3、l组、10ng／ml组与20n∥ml组间抑制率差异具有统计学意义(尸姐∞)，其余各相邻浓度组间增殖抑制率虽然随药物浓度增加有上升趋势，但无统计学意义(P>a舾)2．单纯雷帕霉素、联合雷帕霉素+紫杉醇、单纯紫杉醇作用于人胃癌SGC一7901细胞一定时间后均可显著抑制细胞增殖，各组抑制率随药物作用时问的延长均增加，且雷帕霉素+紫杉醇组增加更显著，与单纯雷帕霉素组、单纯紫杉醇组相比差异有显著性(p

4、的表达，且药物浓度在40n咖1时抑制作用最显著。4．Westemblot法显示，雷帕霉素可抑制人胃癌SGC。7901细胞H1F．10【、VEGF蛋白的表达，药物浓度在20n∥ml时抑制作用明显，40n∥ml时抑制作用更明显。结论雷帕霉素可抑制人胃癌SGC．7901细胞增殖，其抑制作用可能是通过下调人胃癌SGC．7901细胞HIF．1Q、VEGF基因及蛋白的表达，且雷帕霉素与紫杉醇合用对抑制人胃癌SGC．7901细胞增殖具有协同作用。关键词雷帕霉素；紫杉醇；胃癌；HIF—la；VEGF徐州医学院硕士学位论文Thesynergisticeffectofrapamyci

5、ninhibitingtheprolif．erationofgastriccancercelltreatedwithtaxolandtheprollleratlon01gaStrlccanCerce¨treatedwithtax0IandtheeIkctofHIF一1伐，VEGFexpressioningastriccancerceHObjectiveeffectedwithrapamycinAbstractToobseⅣethesynergiSticeffectofrapamycininhibitingtheproliferationofgastriccance

6、rcelltreatedwithtaxolandtheef诧ctofHIF．1Q．VEGFexpressloningastriccancercene日’ectedwithRapamycinandtoapproachthee仃ectofgrowthandproliferationmechallismofgastriccancertreatedwithrap锄ycin．MethodsToculturegastriccallcercellJineSGC．7901invitro，gastriccancercells、veretreatedwithrapamycin．Cel

7、lproliferationwasassessedbvMTTassav．ToculturegastriccancercelllineSGC-7901invitro，gastriccancercellsweretreatedwithrapamycinand(or)taxol-CeUproliferationwasassessedbyMTTassaygastriccancercellsweretreatedwithrap锄ycin．Semi-quantitativeRmPCRdetectoftheexDressionofHIF-lcca11dVEGFmRNAchang

8、es．ga