酸橙果实不同采收期化学成分动态变化及枳实、枳壳药材质量评价研究

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1、学位论文StudiesonDynamicChangesofChemicalComponentsinFruitfromCitrusaurantiumL．atDifferentHarvest．Periods，andQualityEvaluationofFructusAurantiiImmaturusandFructusAurantii申请学位级别：亟．±专业名称：药物．丝堂论文提交时间：2Q!至釜垒旦．论文答辩时间：2Qi2生主县二O一二年四月中文摘要酸橙主要分布于四川、重庆、湖南、江西等地，源于酸橙不同采收期的药材有枳实和枳壳，枳实5～6月采收，枳壳7月果皮尚绿时采收。“川

2、枳实、川枳壳”品质佳，行销全国各地，是四川的道地药材之一。“湘枳实、湘枳壳”发展很快，产量大，是全国商品生产基地。江西枳实、枳壳以清江县黄岗和新干县三湖洲的最著名，为传统道地药材。枳实、枳壳来源相同，而不同的采收期又使两药在作用部位、作用强度等方面各有特性。如同为理气药，中医认为枳实专利低位性气滞，。而枳壳专利高位性气滞：枳实力猛，枳壳力缓。现行药典标准对枳实以辛弗林为质控指标，对枳壳以柚皮苷和新橙皮苷为质控指标，并未体现二者在功效上的共性与特性。由于质量评价体系不完善，有关酸橙果实不同采收期成分系统分析比较研究未见相关报道。本研究对酸橙果实(5月至9月，每半月采摘一次)

3、首次进行了从植株挂果到果实成熟的整个生长期的研究，并以主要活性成分黄酮类、生物碱类、酚酸类、柠檬苦素等为指标，系统研究酸橙果实整个生长期内化学成分动态变化规律，为酸橙枳实、枳壳采收期的制定及质量评价体系的完善提供实验依据。研究内容及结果如下：1．酸橙果实不同采收期化学成分比较研究对酸橙果实不同采收期黄酮类成分、生物碱、总酚酸、柠檬苦素的含量变化进行了对比分析，以期为酸橙枳实、枳壳药材采收期的制定提供实验依据。1．1黄酮类成分枳实及枳壳药材中所含黄酮类成分主要以芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷等为主，本研究采用HPLC法和Uv法分别测定上述4种黄酮苷及总黄酮含量。结果表

4、明：随着酸橙果实成熟度的增加，总黄酮含量从41．13％降至8．28％，其中橙皮菅和新橙皮苷的含量呈现递减的变化趋势，而芸香柚皮苷和柚皮苷的含量呈现先增加后降低的变化趋势。黄酮类成分间存在何种转化关系有待进一步研究。1．2生物碱类成分采用H．PLC法和uV法分别测定药材中辛弗林和总生物碱的含量。结果表明：随着酸橙果实成熟度的增加，总生物碱和辛弗林的含量均呈现递减的变化趋势，其中总生物碱含量从10．35％降至1．2％，辛弗林含量从0．79％降至0．22％。1．3总酚酸文献报道，酚酸类成分不仅具有抗氧化、抗自由基、抑制低密度脂蛋白的氧化以及预防心血管疾病的作用，而且还具有抗癌、

5、抗炎症和抗血小板凝聚等功能。目前，枳实、枳壳中酚酸类成分研究较少，本研究首次比较分析了酸橙果实不同采收期药材中总酚酸含量变化规律。随着酸橙果实成熟度的增加，总酚酸的含量从8．73％递减至0．55％，研究结果为酸橙果实中酚酸类提取物原药材选择提供了实验依据。1．4柠檬苦素柠檬苦素作为苦味物质，在柑橘属果皮中普遍存在。文献报道具有抗炎、镇痛、抗癌等广泛的药理活性，本研究采用HPLC法，首次比较分析了酸橙果实不同采收期药材中柠檬苦素含量变化规律。随着酸橙果实成熟度的增加，柠檬苦素含量在6月中旬最高(O．5％)，随后呈现先下降后升高再下降的变化，9月初的药材中含量最低(0．26％

6、)，研究结果为酸橙果实中柠檬苦素提取物原药材选择提供了实验依据。以上结果表明，随着酸橙果实成熟度的增加，总黄酮、总生物碱、总酚酸、橙皮苷、新橙皮苷、辛弗林的含量均呈现递减的变化趋势；柚皮苷、芸香柚皮苷的含量呈现先增加后降低的变化趋势；柠檬苦素的含量呈现先升高，随后下降再升高再下降的波动变化。研究结果为酸橙枳实、枳壳采收期的制定提供了实验依据。2．枳壳药材不同部位化学成分比较研究雷敦最先提出枳壳用时先去瓤，明代陈嘉谟认为“去瓤免胀”。且核瓤极易发霉、虫蛀、变质，炮制过程中筛去核瓤。既往文献报道中，尚无关于枳壳果皮、核瓤不同部位有效成分含量比较研究。本研究比较分析了枳壳果皮、

7、核瓤中黄酮类和生物碱类成分含量。结果，枳壳果皮与核瓤中均存在芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、辛弗林等有效成分，且果皮中的含量高于核瓤。枳壳核瓤中尚存在多种有效成分，对加工炮制过程中产生的核瓤可再利用，本研究为枳壳药材资源的综合利用提供了依据。3．枳实、枳壳挥发油成分比较研究3．1挥发油提取方法研究挥发油作为二者主要药效成分之一，目前对枳实、枳壳挥发油的提取方法多数为传统的水蒸气蒸馏法，而对其它方法如溶剂回流法、超声提取法等研究较少。本研究采用GC—MS技术分别对挥发油成分、石油醚超声提取物、乙醚超声提取物、正己烷超声提取