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《大肠杆菌抗氧化应激反应的蛋白质组学分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、生命科学学院本科毕业论文题目：大肠杆菌抗氧化应激反应的蛋白质组学分析专业：生物技术班级：07（1）班姓名：王芳指导教师：潘建义学号：M07860120入学年月：2007年9月选题来源：纵向课题报告日期2011年05月24日浙江理工大学本科毕业论文诚信声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的毕业论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：日期：年月日摘要在细胞
2、代谢过程中，部分电子逃逸出氧化还原系统，以氧分子作为电子受体，产生具有毒害作用的高能量活性氧分子（reactiveoxygenspecies，ROS），包括超氧阴离子、单线态氧、过氧化氢、羟自由基和脂质过氧化的中间产物。活性氧是一种广谱杀菌剂，是宿主细胞抗菌作用的有效方式。但细菌在长期的进化过程中必然会发展出多种对策来抵抗宿主所产生的活性氧的杀菌作用。为检测与此相关的蛋白质，本研究主要通过正常及氧化应激条件下对大肠杆菌k12的培养，差速离心法提取膜蛋白进行SDS-PAGE，挖取具有明显差异的蛋白质条带，经胶内酶切处理，利用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI-TO
3、F-MS/MS)进行鉴定分析。结果鉴定到两种具有明显差异的蛋白，麦芽糖孔蛋白、外膜蛋白OmpA表达量明显下降，这两种蛋白主要与小分子物质渗透进入细胞有关，因此可以推测细菌为了适应周围环境的改变关闭膜上小分子通道，减少过氧化氢摄入细胞内，进而减少过氧化氢的毒害作用。通过本研究，我们可以初步阐明大肠杆菌的氧化应激机制。关键词：活性氧；氧化应激反应；膜蛋白；MALDI-TOFMS/MS；过氧化氢ABSTRACTDuringthemetabolisminthecell,oxygenmoleculesasanimportantelectronacceptor,Alsoaccompani
4、edbysomeelectronicescapefromtheredoxsystem,producesomehighenergyreactiveoxygenspecieswhichhaspoisoned,includingsuperoxideanion(O2-),singletoxygen,hydrogenperoxide,hydroxylradical,alsoincludestheintermediateproductsoflipidmetabolism.Reactiveoxygenspecies(ROS)isabroad-spectrumfungicide.Itison
5、eoftheeffectivewaytohostcellantimicrobial.However,bacteriainthelong-termevolutiondevelopmentofavarietyofstrategiestoresistthehostimmunebactericidalaction.Todetectwhichproteinsassociatedwiththissystem,inthisstudy,mainlythroughtrainingtwogroupofthepathogenicE.coli,theoneTreatmentbyhydrogenper
6、oxide,theotheroneasthecontrolgroup,Brokencellsbyultrasound.Extractionthemembraneproteinsbydifferentialcentrifugation,makeaSDS-PAGEelectrophoresiswiththeProtein,Diggingthesignificantdifferenceproteinband,aftergeldigestion,thenidentifiedbyMALDI-TOF-MS/MS.Wefoundtwoproteinswhichhavesignificant
7、difference,theyareMaltoporinandoutermembraneproteinA(OmpA).MaltoporinandOmpAareassociatetothesmallmoleculespenetrateintothecells.Therefore,wecanspeculatethattoadapttotheenvironmentBacteriaClosemembranechannelsofsmallmoleculestoreducetheintakeofintracellu
