干扰素-λ1对慢性hbv感染青少年患者外周血清来源树突状细胞功能的影响

《干扰素-λ1对慢性hbv感染青少年患者外周血清来源树突状细胞功能的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、河北医科大学硕士学位论文干扰素--λ1对慢性HBV感染青少年患者外周血清来源树突状细胞功能的影响姓名：胡朝刚申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：周俊英201203中丈摘要干扰素．九1对慢性HBV感染青少年患者外周血来源树突状细胞功能的影响摘要目的：现研究认为乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus，HBV)主要通过宿主免疫应答与免疫反应引起肝细胞的损伤和破坏，由于宿主的免疫反应不同HBV感染所引起的临床表现和转归各不相同。根据免疫学特点，婴幼儿期HBV感染自然过程在临床上可以分为四期，①免疫耐受期；②免疫清除期；③非活动HBV携带状态；④再活动期，目前t-

2、IBV感染慢性化的确切机制尚不明确。HBV感染后树突状细胞(dendriticcell，DC)抗原提呈功能低下可能是HBV感染慢性化的原因之一。DC是目前所知机体内功能最强的APC(antigen．presentingcell，APC)，DC作为机体内免疫反应的始动、调节和效应者，具有激括CD8十CTL和CD4+T辅助细胞的能力，控制着体内免疫反应的过程，因而DC已成为机体免疫应答的中心环节。DC最大特点是能够显著刺激初始T细胞进行增殖，而巨噬细胞和B细胞仅能刺激己活化或记忆性T细胞，所以DC在免疫应答诱导中具有独特地位，是机体免疫应答的始动者。成熟DC可高表达C

3、D80、CD83、CD86和儿A．DR的细胞表面分子。干扰素Z(interferon．九，IFN一九)是2003年由美国科学Kotenko矛I：lSheppard等应用生物信息学手段从人的基因组中共同发现的一类新型干扰素，包括IFN．九】(IL一29)，IFN—k(IL．28A)和IFN—k3(IL一28B)。近年研究发现干扰素入主要来源于DC并且对DC的成熟和功能具有重要调节作用。研究发现IFN．入，能诱导DC的成熟以及增强它的抗原提呈功能。关于报道干扰素九在丙型病毒性肝炎中的研究进展很多，但在慢性HBV感染过程中对DC功能的影响在国内外报道很少。本研究旨在探讨

4、干扰素九，对HBV慢性感染青少年患者免疫耐受期与免疫清除期外周血来源DC细胞功能的影响及临床意义。方法：选取青少年慢·t生HBV感染者34{Y4，其中免疫耐受期l8例，免疫清除组16例，健康对照10例。所有慢性乙型肝炎患者均行肝组织活检，炎症分级为G0～G4，纤维化程度分为SO～S4。1体外DC培养：留取受试者和正常者新鲜外周静脉血，密度梯度离心法中文摘要分离PBMC，无血清培养基悬浮沉淀细胞，收集贴壁细胞分-)8．：单独组(重组人白介素一29)；正常培养组(重组人白介素。4、重组人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子)；IFN．九，组(重组人白介素．4、重组人粒细胞一巨

5、噬细胞集落刺激因子和重组人白介素．29)共同培养，均培养7天。2培养过程中在倒置显微镜下观察各组DC成熟状态3收集成熟DC用PE．DC80、PE．CD83、PE—CD86矛NPE一儿A．DR抗体进行染色，流式细胞仪检测表达情况。4收集细胞培养上清液，ELISA法检测I岍．v，IL一12分泌情况。结果：1DC形态学观察：PBMC经2。4d'时贴壁后，可见部分细胞悬浮，多数为B细胞和外周血DC；单独组(IL．29)在培养第2、5和7天后未见贴壁细胞有形态改变，延长至11天后仍未变化；正常培养组(IL一4、GM．CSF)与IFN。入1组(IL一4、GM．CSF署HIL。

6、29)培养过夜后贴壁细胞数量有所减少，细胞体积小；诱导培养2天后可见贴壁细胞伸展，形态明显改变，培养5天后细胞形态不规则，粗细不等的毛刺多而密，成典型的DC形态；第7天DC表面突起更加明显；在IFN．九，组(IL一4、GM．CSF幂NIL一29)可见细胞成簇，并且大量突起交织。2流式细胞术检测细胞表面标志结果：培养7天后，免疫耐受组和免疫清除组DC表面分子CD80、CD83、CD86和眦A—DR表达均低于正常对照组，差异具有统计学意义(p

7、)：经过IL．29诱导后DC高表达CD80、CD83、CD86和皿A．DR并且免疫清除期患者的表达明显高于免疫耐受期，差异具有统计学意义(p

8、后能明显促