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时间:2019-02-22
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1、重庆医科大学硕士学位论文局部缺血对mTOR信号通路的影响姓名:黄谢梅申请学位级别:硕士专业:皮肤病与性病学指导教师:郝进201205重庆医科大学硕士研究生学位论文局部缺血对mTOR信号通路的影响摘要第一部分小鼠皮肤局部缺血模型的建立目的:研究建立稳定的昆明小鼠皮肤局部缺血模型。方法:取40只雌性昆明小鼠,随机分为A/B两组,每组20只。分别在小鼠背部建立深达皮肤筋膜层的U型皮瓣。A组为3.3×1.5cm皮瓣组,B组为2.5×1.5cm皮瓣组。皮瓣游离缘垫以医用橡胶,缝合切口,造成皮肤缺血模型,术后观察皮瓣发绀水肿及坏死情况,并用散斑全景
2、实时血流成像仪(MoorFLPI)检测皮瓣血流。结果:肉眼观察,3.3×1.5cm皮瓣组在术后第2天,50%小鼠皮瓣末端坏死,坏死面积达皮瓣面积的(37.20士4.83)%。术后第3天100%小鼠皮瓣末端坏死。并随时间的延长,坏死面积逐渐扩大。2.5×1.5皮瓣组在术后第l天皮瓣出现发绀,水肿,发绀水肿面积占(77.46土4.51)%,术后第3、第5天发绀水肿区面积逐渐减小,至术后第7天,发绀、水肿完全消退。散斑全景实时血流成像仪(MoorFLPI)检测皮肤血流显示,术后第1天皮瓣显著性缺血(p3、水平。结论:成功建立了昆明小鼠皮肤局部缺血模型,该模型具有操作重庆医科大学硕士研究生学位论文简单、成本低、稳定、有效等优点。关键词:小鼠;皮肤缺血;微血管再生模型。第二部分局部缺血对mTOR信号通路的影响目的:通过研究缺血对组织中P.4E.BPl,P.p70S6K,P.S6蛋白表达的影响,探讨缺血对蛋白质翻译mTOR信号通路的影响。方法:将30只昆明小鼠随机分为6组(每组5只):正常对照组(即缺血O分钟组),缺血15分钟组,缺血30分钟组,缺血1小时组,缺血4小时组,缺血24小时组。除对照组外,分别在其余各实验组小鼠背部建立2.5×1.4、5cmU型皮瓣缺血模型。蛋白质免疫印迹法检测不同缺血时相点组织中P一4E—BPl,P—p70S6K,P-S6蛋白的表达。结果:在缺血30分钟及l小时时,组织中P.p70S6K,P.S6蛋白的表达量均明显高于正常组(P5、磷酸化,促进蛋白质翻译;而较长时问缺血(缺血24小时)可抑制4E.BPl、p70S6K、S6蛋白的磷酸化,抑制蛋白质翻译。关键词:缺血;蛋白质翻译;mTOR信号通路。4THEEFFECTOFLoCALISCHEML~oNMToRSIGNALINGPATHⅥ,AYABSTRACTPART1MOUSEMoDELOFSⅪNISCHEMIAObjectiVe:Tbestablishthemodelofacutesl(inischeIlliai11KuIlMingmice.Methods:FonyfIemalekⅥ1Mingmicewerediv6、idedintoAaIldB觚ogroupsraJldo耐y,20iIleachgroup.GroupAU.shapedpeninsularincision,whichis1.5cminwidma11d3.3cminlen咖,asde印as向11michess,wascreatedontllebackofA一伊oupkunMillgmice.GrOupBU.shapedpeⅢnsulauri11cision,whichis1.5cminwi拙a11d2.5cminlen啦,asdeepass幻nfascla,wascreatedonme7、backoftheotllerfemalekull枷ngmice.Bef.oresutumgfl印sbackinplace,a2.mm.wildmedicalmbbersheetwaslnsertedtos印aratet11enapedges.ThenmenapswereobservedaJldthebloodnowofnapsweremeasuredbyThe如11.6eldlaserpermsioniIllager(FLPI;MoorIns仃啪entsLtd).Results;50%ofmelongernapshadappro)(i8、mately(37.20士4.83)%necroslsontllesecondpostoperatiVeday.Allofthelongerflapsdevelopedaconsiderable锄oumof
3、水平。结论:成功建立了昆明小鼠皮肤局部缺血模型,该模型具有操作重庆医科大学硕士研究生学位论文简单、成本低、稳定、有效等优点。关键词:小鼠;皮肤缺血;微血管再生模型。第二部分局部缺血对mTOR信号通路的影响目的:通过研究缺血对组织中P.4E.BPl,P.p70S6K,P.S6蛋白表达的影响,探讨缺血对蛋白质翻译mTOR信号通路的影响。方法:将30只昆明小鼠随机分为6组(每组5只):正常对照组(即缺血O分钟组),缺血15分钟组,缺血30分钟组,缺血1小时组,缺血4小时组,缺血24小时组。除对照组外,分别在其余各实验组小鼠背部建立2.5×1.
4、5cmU型皮瓣缺血模型。蛋白质免疫印迹法检测不同缺血时相点组织中P一4E—BPl,P—p70S6K,P-S6蛋白的表达。结果:在缺血30分钟及l小时时,组织中P.p70S6K,P.S6蛋白的表达量均明显高于正常组(P5、磷酸化,促进蛋白质翻译;而较长时问缺血(缺血24小时)可抑制4E.BPl、p70S6K、S6蛋白的磷酸化,抑制蛋白质翻译。关键词:缺血;蛋白质翻译;mTOR信号通路。4THEEFFECTOFLoCALISCHEML~oNMToRSIGNALINGPATHⅥ,AYABSTRACTPART1MOUSEMoDELOFSⅪNISCHEMIAObjectiVe:Tbestablishthemodelofacutesl(inischeIlliai11KuIlMingmice.Methods:FonyfIemalekⅥ1Mingmicewerediv6、idedintoAaIldB觚ogroupsraJldo耐y,20iIleachgroup.GroupAU.shapedpeninsularincision,whichis1.5cminwidma11d3.3cminlen咖,asde印as向11michess,wascreatedontllebackofA一伊oupkunMillgmice.GrOupBU.shapedpeⅢnsulauri11cision,whichis1.5cminwi拙a11d2.5cminlen啦,asdeepass幻nfascla,wascreatedonme7、backoftheotllerfemalekull枷ngmice.Bef.oresutumgfl印sbackinplace,a2.mm.wildmedicalmbbersheetwaslnsertedtos印aratet11enapedges.ThenmenapswereobservedaJldthebloodnowofnapsweremeasuredbyThe如11.6eldlaserpermsioniIllager(FLPI;MoorIns仃啪entsLtd).Results;50%ofmelongernapshadappro)(i8、mately(37.20士4.83)%necroslsontllesecondpostoperatiVeday.Allofthelongerflapsdevelopedaconsiderable锄oumof
5、磷酸化,促进蛋白质翻译;而较长时问缺血(缺血24小时)可抑制4E.BPl、p70S6K、S6蛋白的磷酸化,抑制蛋白质翻译。关键词:缺血;蛋白质翻译;mTOR信号通路。4THEEFFECTOFLoCALISCHEML~oNMToRSIGNALINGPATHⅥ,AYABSTRACTPART1MOUSEMoDELOFSⅪNISCHEMIAObjectiVe:Tbestablishthemodelofacutesl(inischeIlliai11KuIlMingmice.Methods:FonyfIemalekⅥ1Mingmicewerediv
6、idedintoAaIldB觚ogroupsraJldo耐y,20iIleachgroup.GroupAU.shapedpeninsularincision,whichis1.5cminwidma11d3.3cminlen咖,asde印as向11michess,wascreatedontllebackofA一伊oupkunMillgmice.GrOupBU.shapedpeⅢnsulauri11cision,whichis1.5cminwi拙a11d2.5cminlen啦,asdeepass幻nfascla,wascreatedonme
7、backoftheotllerfemalekull枷ngmice.Bef.oresutumgfl印sbackinplace,a2.mm.wildmedicalmbbersheetwaslnsertedtos印aratet11enapedges.ThenmenapswereobservedaJldthebloodnowofnapsweremeasuredbyThe如11.6eldlaserpermsioniIllager(FLPI;MoorIns仃啪entsLtd).Results;50%ofmelongernapshadappro)(i
8、mately(37.20士4.83)%necroslsontllesecondpostoperatiVeday.Allofthelongerflapsdevelopedaconsiderable锄oumof
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