大鼠重症急性胰腺炎时细胞内ca2+对肺泡ⅱ型上皮细胞凋亡的影响

大鼠重症急性胰腺炎时细胞内ca2+对肺泡ⅱ型上皮细胞凋亡的影响

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1、大鼠重症急性胰腺炎时细胞内Ca2+对肺泡II型上皮细胞凋亡的影响计:学位论文:46页表格:10个插图:58幅王超指导教师:陈海龙教授申请学位级别:硕士学位专业名称:外科学论文提交日期:2012年4月论文答辩日期:2012年5月学位授予单位:大连医科大学学位授予日期:2012年6月评阅人:答辩委员会主席:独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学

2、位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:缝签字Et期:丝生年上月立日目录一、摘要·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6(~)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6(、~)日U吾⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯一⋯⋯⋯“⋯”“⋯”一⋯”一⋯”“

3、⋯”“。6(二)材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27(六)附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28(七)参考文献⋯⋯Q0Q00·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯000⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42四、附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45五、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·46大鼠重症急性胰腺炎时细胞内Ca2+对肺泡II型上皮细胞凋亡的影响硕士研究生:王超指导老师:陈海龙教授专业名称:外科学摘要目的:揭示重症胰腺炎相关肺损伤的主要发病机制,探讨中药清胰汤、地塞米松、维拉帕米对肺泡II型上皮细胞的凋亡、胞内游离钙离子浓度、Bax及CaSpase一8相关凋亡基因调控系统及促炎细胞因子表达水平的影响。为揭示胞内游离钙离子超载与细胞凋亡的相关性、

5、细胞凋亡介导的肺损伤机制及药物的保护机制提供了实验依据和理论指导。方法:(1)健康雄性SD大鼠60只随机分为5组,每组12只:模型组(SAP组),对照组(CON组),清胰汤治疗组(QYT组),地塞米松治疗组(DEX组),维拉帕米治疗组(VER组)。采用经十二指肠乳头胰胆管逆行注射1.5%脱氧胆酸钠(1ml/kg体重/只/次),建立SAP模型。CON组开腹后仅轻微翻动胰腺数次。药物治疗组大鼠在规定时间点分别给予药物处理。地塞米松组(剂量:0.2ml/1009体重/只/次,缓慢静推,速度0.3ml/min)及维拉帕米组(O

6、.05ml/1009体重/只/次,用生理盐水稀释至地塞米松组等容缓慢静推,速度0.3ml/min)于造模后立即静脉注射药物一次及造模后6h,12h分别再次给药。清胰汤组(剂量:1.0ml/1009体重/n/次)造模前0.5h经胃管灌入中药清胰汤一次及造模后6h,12h分别再灌胃一次。(2)在造模后24h,分离培养肺泡II型上皮细胞,用流式细胞仪检测细胞凋亡率、用激光扫描共聚焦显微镜检测胞内游离的钙离子浓度及反转录法检测凋亡基因Bax及Caspase.8的转录水平;并且行肺组织和胰腺组织病理学检查;用免疫组化法检测Bax

7、和CaspaSe一8的蛋白表达;用放免法测定血清细胞因子;全自动生化分析仪进行血气分析;采用真空干燥法检测肺湿/干比重。结果:与对照组相比,肺组织病理切片HE染色结果显示SAP组符合ALI的改变;SAP组动脉Pa02明显降低(P

8、CR结果显示SAP组肺泡II型上皮细胞的Bax及Caspase.8凋亡基因表达明显增高(P

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