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时间:2019-02-22
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1、不同品种枣内果皮发育过程中木质素沉积的观察比较-农学论文不同品种枣内果皮发育过程中木质素沉积的观察比较孟泽1,余佳1,杨爱珍2,师光禄2,张铁强3,王有年3(1北京农学院植物科学技术学院,北京102206;2北京农学院生物科学与工程学院,北京102206;3农业部都市农业(北方)重点开放实验室,北京102206)摘要:为了解木质素含量在不同品种不同时期的变化过程,以‘金丝小枣’和‘金丝无核小枣’为试验材料,利用Klason法测定枣果实内木质素含量和木质素的显色反应,研究枣果实内木质素沉积的动态变化。结果显
2、示:枣果实中内果皮的木质素沉积过程是从基部开始,完成内果皮最内侧的木质化,再由内至外,逐渐完成;在花后15~25天期间,‘金丝小枣’与‘金丝无核小枣’果实内果皮木质素含量基本相同,从花后40天开始,‘金丝小枣’内木质素含量开始上升并超过‘金丝无核小枣’。‘金丝无核小枣’果实内木质素含量在全果实发育时期内变化总体趋势平缓,而在‘金丝小枣’内木质素含量的在15~75天期间变化增加明显,在75天后出现跳跃式增长现象,增加更为明显。试验选用的2个品种枣在内果皮木质化过程中存在着明显的差异,可以用来进行枣果实内果皮
3、木质化的相关研究。关键词:枣果实;内果皮;木质素沉积中图分类号:S665.1文献标志码:A论文编号:cjas150700170引言枣(ZiziphusjujubaMill.)是起源于中国并被栽培过3000多年的鼠李科枣属果树,由于枣在发育过程中会有柱基分生组织和花盘分生组织参与到果实的发育过程中,这使枣果实的发育过程有别于其他的核果类果实,所以枣属于拟核果[1]。枣果实的果皮分为内、中、外3层,其中果核,即内果皮是由子房室内壁发育而来[2-3]。枣果实内果皮的发育与木质素的沉积有着极其密切的联系,枣果实内
4、果皮的发育过程就是其木质素沉积的过程。枣果实中内果皮木质化程度高且不易去除,导致后期加工处理复杂。因此研究枣果实内果皮发育过程中木质素的沉积变化可以为枣果实内果皮木质化机理的阐明奠定理论基础,为提高果实品质及改良品种提供有价值的信息。‘金丝小枣’是国内目前栽培最为广泛的优良枣树品种之一[4],口感优良[5-7],’金丝无核小枣’是其在长期的栽培过程中产生的许多品种类型之一[8-12]。这2个品种间除果实核层硬化程度的差异外,其他植物学特征基本相同[13]。近年来对无核枣的研究相对较少,仅谭洪花[14]、彭
5、建营[15]、韩斌[16]、贾彦丽[17]等对无核枣的分子标记及解剖学有过初步研究。笔者测定了‘金丝无核小枣’和‘金丝小枣’2个品种的生长曲线,并采用Klason法和间苯三酚染色法分别对2个枣品种不同发育时期的木质素含量及木质素沉积情况进行观察检测。1材料与方法1.1试验材料材料均取自北京市丰台区中华名枣博览园,每个品种随机选取长势良好的枣树3棵,分别在盛花期后15、25、40、55、75、100天采集样品。采样完成后马上运回实验室测定生理指标,之后将每个品种所有同期果实放在一起,随机均分为5个重复,置于
6、4℃冰箱中准备试验。1.2试验方法1.2.1生长曲线的测定用十分度游标卡尺测量各时期果实样品的横纵径,然后再用1/100的电子天平称量果实的湿重;将3个果实单独放入逐一编号的培养皿中,放入烘箱中烘干,每隔2h将样品取出,逐一在1/100的电子天平上称量其质量,直至恒重。1.2.2木质素含量测定测定木质素含量所采用的Klason法是利用重量分析测定木质素含量的经典方法,其原理是用72%硫酸除去纤维素,难溶的木质素经过滤、洗涤、干燥称重、计算等步骤可得到其含量[18]。选取适量内果皮进行研磨,使其完全粉碎后称
7、取1.0g的内果皮置于试管中,加入70%的浓硫酸6mL;在35℃的条件下恒温保存7h后,使用100mL双蒸水将其冲洗到三角瓶中并进行密封,然后在高压灭菌锅里进行灭菌,之后将灭菌好的溶液倒入到G4砂芯漏斗抽滤,再用热的双蒸水进行冲洗;将冲洗后的渣子置于烘箱中,60℃烘干至恒重,用式(1)计算木质素含量[19]。1.2.3木质素沉积染色观察使用间苯三酚-盐酸(1%的间苯三酚溶于95%的乙醇中)染色法检测枣果实木质素沉积动态[20],间苯三酚与木质素的反应是具有特异性的,在酸性条件下,木质素中的肉桂醛基团能够与
8、间苯三酚发生显色反应,生成的化合物呈粉红色[21-22]。分别对不同发育时期的果实样品进行横切和纵切,向切面滴加间苯三酚溶液至完全覆盖切面,静置3min左右再滴加38%浓盐酸至完全覆盖切面,其中的木质素组织即刻呈现出粉红色,完全显色后,放置在体视显微镜下进行拍照记录[23]。2结果与分析2.1枣果实生长曲线‘金丝无核小枣’果实纵径在花后15~40天期间增长速率较快,40~100天期间增长变缓;果实横径在果实发育全时期增长速率平
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