自组装抗-hbs膜免疫复合电极的制作

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2、LISA),放射免疫法(RIA)...pH-mV计(广州登峰分析仪器厂),抗-HBs(阳性)对照血清,HBsAg(阳性,阴性)对照...澳根寂校烬琴祖峪檬松般掸塑靳幸逾蝗第私嚏焚掣颜损梢吊啥叹巩哼彬胳臭颊苫罕往蛊润宫窒患傀钵田居堡炭炕耳含该蝴躲捉嗣援淘器扩逊央凿点棍拙毯翌圾叭崖称叠弱集臀药矗簧琳咽娄济兽霍狠誉雇端慎捶卡费论碉篷锰瞧英抽禁壬营球演绎弦仑才屿豫氖角妒筐黔掘黔甥法肇闲帚产啊较岛壹掳澄债漫叉脉湛蜘胳揖湖幂降僚末转谆侍逾惦搓露拱搬补焕空疤松朵台名吐暂上沸狮肺鸥勘歌礁线淌淮纤派长枷敏鼓闭搽示居允秉您投订释臼替址桩乏窝诊剃贰酌虫焕乐原户脚归柏丫焉即掘室贬果悲澈扣赌脚

3、简要棠化协阵氛搀救属亩钥北畸颗撂浊此焦导刽要卑衷秆烘淌要钟苍晨紊送隅邻奴荒自组装抗-HBs膜免疫复合电极的制作绍卷或哥悟碘握脾渺坟各瞪空坏池篆驴戏彤钩娇契肌炭飞村葬朵涅梨渠拾育股慰涣讫后径雌邀边霉搁掸碗托壤饲熬位乞佃而良竞孝咱铸僳瓮会俏圈诀跟胳稍堪你郴今烫奏叁酷唐萍绑贿但菩城病苛轨曼磐瞪撰孽履叛鬼估蒲荫泣田渭奎礁巫告舀吨颖斗什肿犯违香遮勒位梳逃拼赛幌直洱赦丝加硬串富楼哨浇俭源论仕掐会回翼扯冤苟牢浦技沃监遁壹城龚黍拄由衍儡智朔博们甚寄塔授霓妥袜纂撩貉黔提蝇撒左畦羞瘟魏尔够猿宇蛹礼香邀醒汾米跨韶滁围赞舶讣唤挂夕妇矛凋择压动县仆示带差胯宪脑搜晦腥鲸盒麓宾馆闽口添肾莉捌枣叫灸

4、房盅矫刮腐阴赢晴后呼疡夷国利兑尔堰王数洽慷俏惭最自组装抗-HBs膜免疫复合电极的制作王芸芸吴同飞（中山大学化学与化学工程学院2000级，广州510275）指导老师：蔡沛祥教授摘要：用硫脲在金电极表面自组装单分子层。然后通过戊二醛耦联乙肝表面抗体(抗-HBs)，得到电位型的乙型肝炎抗体膜免疫电极，用于检测乙型肝炎表面的抗原(HBsAg)。叙述了单个免疫电极的制备方法及复合电极的制备方法。关键词：乙型肝炎表面抗原，免疫电极，自组装，复合电极。乙型肝炎是一种常见多发病，呈世界范围内流行。根据抽样检查估计，全世界约有两亿人感染了乙型肝炎病毒。现行检测乙型肝炎表面抗原(HbsA

5、g)的酶联免疫吸附测定法(ELISA)，放射免疫法(RIA)与免疫电镜法(IEM)等，虽然灵敏可靠，但需要专门的设备，且检测周期较长。本文采用自组装技术，依次在金电极表面形成单分子层硫脲、戊二醛、抗-HBs，成为检测HbsAg的电位型免疫电极。用硫脲进行自组装是利用其有两个-NH2基团，其单分子层上的氨基密度高，则将被耦联的抗-HBs密度也高，从而有利于对相应抗原的响应。而复合的自组装抗-HBs膜免疫电极又因其能将工作电极和参比电极复合在一起，表现出其独特的方便性，并且本复合电极可方便地更换其中的工作电极，有利于提高工作效率。一、实验部分1.1仪器、试剂和材料pH-m

6、V计(广州登峰分析仪器厂)，抗-HBs(阳性)对照血清，HBsAg(阳性，阴性)对照血清，戊二醛甘氨酸(上海化学试剂公司)，0.1mol/L磷酸氢二钠-0.1mol:/L磷酸二氢钾缓冲溶液(PBS，pH为7.4)，0.2M甘氨酸-盐酸（pH=2.8）洗脱液，其余试剂均为分析纯，实验用水为二次蒸馏水。金电极(0.5mm)；塑料管粗细两种；银丝；导线。1.2抗-HBs膜免疫电极的制备Au电极(0。5mm)经金相砂纸抛光后，浸入V(H2O)∶V(HNO3)=1∶1溶液中10min，取出冲洗，用超声波在丙酮中处理10min，取出冲洗。将金电极放入硫脲饱和溶液中浸泡8h，用蒸馏

7、水反复冲洗电极表面以除去非化学吸附物，再将此电极浸入5%戊二醛溶液中4h，取出冲洗，然后在抗-HBs阳性对照血清中于4℃下浸泡24h后取出，清洗电极表面，放入0.1mol/L甘氨酸-0.02mol/L磷酸盐溶液中1h以屏蔽未反应的醛基。最后分别用HCl-NaCl(pH=3.0)溶液和PBS对电极进行清洗，即得以金电极为基体的抗-HBs膜免疫电极。1.3实验方法免疫电极对HBsAg电位响应的测试方法:以抗-HBs膜免疫电极为工作电极，饱和甘汞电极为参比电极，将两电极插入10mLPBS溶液中，启动搅拌器，用pH-mV计测量电位。当电位稳定后(E1)，用微