il-17、il-27在大鼠铜绿假单胞菌肺部感染中的表达变化及机制探讨

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1、徐州医学院硕士学位论文IL--17、IL--27在大鼠铜绿假单胞菌肺部感染中的表达变化及机制探讨姓名：张立群申请学位级别：硕士专业：临床检验诊断学指导教师：马萍；李洪春2012-05徐州I医学院硕士学位论文IL．17、IL．27在大鼠铜绿假单胞菌肺部感染中的表达变化及机制探讨中文摘要目的建立大鼠铜绿假单胞菌(PA)肺部感染模型，动态观察细胞因子IL一17和IL．27在大鼠肺部铜绿假单胞菌感染中的变化，探索IL．17、IL一27在铜绿假单胞菌所致肺部感染中的可能作用。方法经口腔直接气管插管法建立铜绿假单胞菌大鼠肺部感染模型。

2、实验组给予PA生理盐水菌悬液(2x108cfu／m1)，对照组给予等体积的生理盐水。分别于感染第0、l、4、7、11和15天利用血细胞计数仪进行白细胞计数及分类；采用ELISA法检测血清中IL．17、IL．27的浓度变化；并于感染后第1和15天取肺组织苏木精．伊红(HE)染色和IL一17免疫组织化学染色，观察大鼠肺组织的病理变化和IL．17细胞因子的表达变化。结果PA感染组大鼠在注入菌悬液1天后出现感染症状，表现为呼吸急促、活动明显减少；大体上肺表面有斑片状出血灶；显微镜下可见肺泡上皮受损，支气管水肿、大量炎症细胞和纤维蛋

3、白渗出，肺泡壁出血，肺部组织表现为急性炎症反应。感染第15天肺脏表面可见陈旧性出血灶；镜下肺泡壁增厚，上皮细胞增生，淋巴细胞大量聚集，肺部组织表现为慢性炎症反应。大体观察和镜下病理均提示肺叶炎性病变，肺组织病理表现由急性炎症反应转变为慢性炎症反应。血细胞计数显示，PA接种后感染组白细胞总数计数于感染后第1天表现为下降[(10．51+1．18)×109／L]，与第0天[(14．42+2．77)×109／LI比较差异有统计学意义(P

4、1天[(9．36士1．05)×109／rq、第15天【(9．10+3．44)×109／L]NNLL较差异有统计学意义(P<0．05)，之后再次下降。中性粒细胞绝对值计数于感染后第1天达峰值[(3．81+0．84)×109／L]，之后逐渐下降，于第15天达最低值[(1．42+0．61)3徐州医学院硕士学位论文×109／L]。淋巴细胞绝对值计数第1天表现为下降[(6．00-土-1．53)×109／L]，与第0天[(10．44+2．40)109／L]、第4天[(7．61+1．77)109／L】、第7天[(7．72+1．08)10

5、9／L]两两比较差异有统计学意义(尸<0．05)；而淋巴细胞计数于第4天上升后维持在一定水平，随后几天之间无统计学差异。白细胞分类结果显示，PA接种后第1天，感染组中性粒细胞百分数达峰值，占白细胞总数(40．66+9．47)％，与其余各时间段两两比较差异有统计学意义(PO．05)；第15天达最低值(15．46+4．08)％，与第1、

6、4、7天两两比较差异有统计学意义(尸

7、绝对值、淋巴细胞百分数和中性粒细胞百分数均无明显变化。肺组织免疫组织化学染色结果显示，感染组大鼠无论在PA肺部感染的急性期还是慢性期肺组织均可见IL．17的高表达，表现为细胞浆呈棕褐色。未感染组胞浆内少见或无棕褐色反应物。一血清细胞因子检测结果显示，血清中IL一17浓度在感染后第4天达高峰为(160．93+3．65)pg／L，分别与第0天[(138．37+13．63)pg／L]、第1天[(140．67士11．98)pg／Ij、第7天[(117．55+12．61)pg／L]、第15天[(119．16+12．30)pg／L]两

8、两比较差异有统计学意义(P