gm-csf对2型糖尿病大鼠创面俞合治疗作用及机制的实验研究

《gm-csf对2型糖尿病大鼠创面俞合治疗作用及机制的实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、GM-CSF对2型糖尿病大鼠创面愈合治疗作用及机制的实验研究计：学位论文：38页表格：4个插图：12幅张春然指导教师：李靖年教授申请学位级别：硕士学位专业名称：外科学论文提交日期：2012年4月论文答辩日期：2012年5月学位授予单位：大连医科大学学位授予日期：2012年6月评阅人：答辩委员会主席：独创性声明J煳嬲本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医

2、科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：磁签字日期：皿年』月≥日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6(一)月lJ舌”一⋯””””⋯

3、⋯一一⋯”⋯一一⋯””⋯⋯一⋯””⋯”一”．6(二)材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36四、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯010ooooooooo⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38GM-0SF对2型糖尿病大鼠创面愈合治疗作用及机制的实验研究硕士生姓名：张春然指导教师：李靖年教授指导小组：南丰副教授专业名称：外科学摘要目的：糖尿病患者创伤后创面不易愈合为临床常见问题，其中又以2型糖尿病患者较为多见。本实验通过应用2型糖尿病大鼠模型，探讨外源性GM．CSF对2型糖尿病大鼠创面愈合的影响及其机制。方法：取2月龄SPF级雌性大鼠70只，体重(200±15)g，在高脂高糖饲料环境下喂

5、养6周后开始造模，造模前禁食12小时，不禁水。STZ用新配制的O．1mmol／L柠檬酸缓冲液(PH=4．2)稀释，大鼠称重后腹腔一次性注射STZ35mg／kg，48小时后血糖平稳时进行血糖监测。选取造模成功的55只大鼠以10％水合氯醛(300rag&g)腹腔麻醉后背部剃毛，在背部中线靠大腿两侧采用模具各制作直径1．5cm的圆形创面，创面面积约为1．77cm2。将皮肤沿画线处切开，深至深筋膜下。随机选取造模成功的40只大鼠分为2组：对照组为糖尿病(DM)创面20只，实验组为糖尿病创面+GM．CSF2

6、0只(创面注入GM．CSFO．5ug／kg)。另取15只大鼠分为5组，每组3只。A组：DM组；B组：DM+腹腔注射生理盐水组；C组：DM+腹腔注射GM．CSF；D组：DM+局部GM—CSF；E组：DM+局部生理盐水组，大鼠分笼饲养。肉眼观察各组大鼠术后第3、5、8、12、18天创面组织愈合情况，同时每天大鼠称重，在尾静脉抽血监测血糖值。记录每只大鼠的体重、血糖变化及身体状况变化情况。利用透明方格纸沿创面愈合外缘描绘得到第3、5、8、12、18天的创面面积，计算创面愈合率。沿愈合创面外缘超出约lcm

7、切下创面组织，制片后光镜观察创面各类细胞、深层组织愈合情况。取样行透射电镜观察成纤维细胞形态，免疫组化实验观察PCNA，BCL．2阳性细胞。结果：在各时间点上，注射GM．CSF药物实验组愈合平均面积明显大于对照组。在愈合时间上，实验组平均为19．50±1．29天，对照组为22，oo±O．82天。HE染色：实验组第3天创面内存在大量渗出物和大量中性粒细胞等炎性细胞，细胞种类、数量多；对照组细胞数量少，组织结构不清晰。实验组第5天组织结构较清晰，开始存在少量肉芽组织和腺样结构；对照组大量细胞浸润，细胞

8、排列混乱。实验组第8．12天可见大量成纤维细胞，出现胶原束和皮肤结构，组织分层愈合良好，出现上皮层和结缔组织层，可见大量毛细血管和少量腺体生成；对照组第8．12天成纤维细胞数量较实验组少，存在少量炎性细胞，组织结构不清晰。18天时两组创面基本愈合，细胞种类减少，存在大量胶原束，毛细血管增多，基本恢复表皮结构；实验组表皮结构较为光滑。透射电镜观察：实验组15000倍下可见成纤维细胞体积较大，形态完好，周围胶原分泌丰富(图3)；40000倍下可见细胞内容物丰富，胞内大量内质网和核糖体，