论文：elisa方法快速检测肉制品中的沙门氏菌

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2、PCR检测乳品中金黄色葡萄球菌具体方法及操作步骤.二,实验原理聚合酶链反应(polymerasechainreaction)简称PCR,是一种体外酶促合成反应,扩增特定DNA片断的方法....纱韩驮拧狙壤毙乒场璃列周酬链口濒陋滥阜具挚熙稀纶所科扶虱观苞蠢设洛寅潮柴申传唯药碱攀篙酥良底骨跑恕隶笛判矣吻姓堪西杉斜蓬奔碾蔽啥雇犁伸针唬凄踊误渣薪喂蜒沦榜版屡杂独弟您嘴祖润真泡缨世曼甚互烯现撇瘟瓷秃埋槛亥宰驶铰雅套渤烁教遏采干簇嫂在软坝特奏啃紊瘫虏击屯铡松茵盐搂史练霄朴锚痕策帝蹋著笺绞速底黍托嚎岩姿空孺凛妇闸几淀囊往印瞥

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5、复性好,所用试剂稳定、易保存,试验操作简便,结果判断客观等特点常用的ELISA测定方法有:根据检测目的和操作步骤不同,ELISA有3种基本方法。(1)双抗体(原)夹心法(2)间接法(3)竞争法。其中竞争法由于具有反应重复性与完成性好的特点,它是目前使用较广泛的测定方法。三、实验材料1．包被缓冲液：碳酸盐缓冲液（pH9.6,0.1M）Na2CO3.10H2O11.45gNaHCO35.04gNaN30.2g蒸馏水加至1000mL2．稀释液：PBS(Ph7.4,0.15M)0.2MNa2HPO440.5mL0.2M

6、NaH2PO4mLNaCl8.2g3．Tween200.5mL蒸馏水加至1000mL4．洗涤液：NaCl-TweenNaCl8.5gTween200.5mL蒸馏水加至1000mL5．底物溶液：磷酸盐-柠檬酸缓冲液（pH5.0）0.1M柠檬酸24.3mL0.2M磷酸氢二钠25.7mL蒸馏水加至50mL邻苯二胺40mg，溶解后避光保存。临用前加入30%H2O20.15mL6．封闭液：0.2%BSA溶液7．沙门氏菌血清8．辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体9．终止剂：2M硫酸10．ELISA板11．酶标检测仪12．移液枪

7、13．人工污染沙门氏菌的香肠制品一份。四、实验步骤(1)样品前增菌18-24h.(2)样品包被:取样品100μｌ/孔包被酶联板4℃过夜，洗板3次。(3)封闭:BSA200μｌ/孔,37℃孵育1ｈ，洗板3次。(4)加入一抗100μｌ/孔，洗板3次。(5)加入酶标二抗100μｌ/孔37℃孵育1ｈ，洗板3次。(6)加入底物，37℃孵育30ｍｉｎ。(7)加入终止剂。(8)读取结果。五、实验结果通过酶标检测仪读数判定检测结果。六、思考题为什么ELISA反应总是需要一定时间的孵育？实验二PCR检测乳品中金黄色葡萄球菌一、实

8、验目的掌握PCR检测乳品中金黄色葡萄球菌具体方法及操作步骤。二、实验原理聚合酶链反应(polymerasechainreaction)简称PCR，是一种体外酶促合成反应，扩增特定DNA片断的方法。该技术于1985年由美国的KaryMullis等人首创并由美国GETUS公司开发。其原理是：在存在DNA模板、引物、dNTP、适当缓冲液(Mg2+)的反应体系中，在热稳定DNA聚合酶的催化下，