论文资料：福建金线莲总黄酮提取工艺的研究

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1、福建金线莲总黄酮提取工艺的研究*关璟,王春兰**,郭顺星,肖培根（中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所，100094，北京，）摘要：目的研究兰科开唇兰属药用植物福建金线莲Ancecotochilusroxburghii总黄酮的最佳提取工艺，为该药材质量研究奠定基础。方法以总黄酮含量为指标，紫外分光光度法为检测手段，利用正交实验设计确定最佳提取工艺。结果所考察的因素中，对福建金线莲总黄酮提取率影响程度为：溶剂浓度>提取次数>提取时间>溶剂用量，其中乙醇浓度对黄酮提取率具有显著影响。结论福建金线莲总黄酮最佳提取工艺为：95%乙

2、醇浸泡过夜，加热回流提取3次，每次1.5hr，溶剂用量均为12倍量。加样回收率为98.51%，RSD%为2.068%。关键词：福建金线莲；总黄酮；正交实验设计中图分类号文献标识码：A文章编号福建金线莲（Anoectochilusroburghii）为兰科（Orchidaceae）开唇兰属（Anoectochilus）珍稀药用植物，又名金线兰、花叶开唇兰等。该植物主要分布于中国南部福建等省，日本、斯里兰卡、印度和尼泊尔等国也有零星分布[1]。金线莲在民间有“药王”、“金草”之美誉，近年来主要用于治疗高血压、糖尿病、心脏病、肺炎、急慢

3、性肝炎、肾炎等症[2]。在对其化学成分系统研究的基础上，认为黄酮类化合物为福建金线莲化学成分中重要组成部分[2-4]。因此以总黄酮为检测指标，紫外分光光度法为检测手段，利用正交实验设计，对福建金线莲提取工艺进行了研究，为进一步的质量控制以及药理活性等研究工作提供可靠资料。1材料、仪器福建金线莲Anoectochilusroxburghii（Wall.）Lindl.购于福建省，由中国医学科学院药用植物研究所郭顺星研究员鉴定。标准品Bu-h（异鼠李素-3-O-芸香糖）为我室从该植物中分离得到，纯度>98%。所用试剂均为分析纯。PHIL

4、IPSPU8800紫外可见分光光度计；电子分析天平（AE240）。2试验方法取待测标准溶液进行200-400nm紫外光谱扫描，如图1所示，标准品Bu-h的最大吸收波长在205,370,254nm处。2.1检测方法的选择样品的原阶紫外光谱图没有显示出黄酮的特征吸收，但其二阶导数光谱图在λ=370nm处有较明显的波动。因此以370nm最为检测波长。__________________________________*国家自然科学基金资助项目（30270148）和国家杰出青年科学基金资助项目（30325047）**通讯作者，Tel：(0

5、10)62899734；E-mail：sxguo2006@yahoo.com.cn图1标准品和样品紫外区扫描图，左为标准品，右为样品紫外吸收光谱图2.2标准品及样品溶液的制备2.2.1标准溶液的制备及标准曲线的绘制取标准品Bu-h10.05mg，用95%乙醇溶于10ml容量瓶。取2ml于50ml容量瓶，加95%乙醇至刻度，得到浓度为0.04020mg/ml的标准溶液。取此标准溶液Vml，置于5ml容量瓶，加95%乙醇至刻度，重复3组，待测。表1标准品浓度与吸光值AV(ml)1.52.02.53.03.5C(µg/ml)12.061

6、6.0820.1024.1228.14A0.3540.46030.5670.6720.787由表1中数据得到标准曲线方程：C=37.30A-1.088，相关系数r=0.9997，线性范围：10.102-25.022µg/ml。2.2.2样品溶液的制备精密称取干燥药材500mg，加入溶剂，浸泡过夜，加热回流提取，提取液转入25ml容量瓶，加95%乙醇至刻度。取该溶液1ml，置于5ml容量瓶，加95%乙醇至刻度，待测。2.3正交实验设计通过预实验，对提取方法，包括索氏提取、回流提取、超声提取，提取溶剂的种类，包括甲醇和乙醇，以及浸泡时

7、间、提取时间、提取次数、提取温度、溶剂用量等因素进行了考察，确定了4个主要因素。同时分别对4个主要因素进行水平的筛选，确定了3个水平。选用常用的四因素三水平L9(34)正交表进行实验。因素水平见表2。因素表2因素水平表水平A(乙醇浓度/%)B(溶剂用量/倍量)C(提取时间/hr)D(提取次数/次)19580.51260101.02350121.53表3直观分析数据表列号实验号1(A)2(B)3(C)4(D)FLY%19580.511.456295101.021.688395121.531.88346081.031.02656010

8、1.510.9054660120.521.05075081.521.020850100.530.9740950121.010.8390k1j1.6761.1671.1601.067k2j0.9441.1891.1841.253k3j0.9441.2