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时间:2019-02-20
《腺病毒介导的白细胞介素10基因对nod鼠1型糖尿病早期胰岛β细胞的保护作用》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、青岛大学硕士学位论文腺病毒介导的白细胞介素10基因对NOD鼠1型糖尿病早期胰岛β细胞的保护作用姓名:张芳萍申请学位级别:硕士专业:儿科学指导教师:李堂20120603腺病毒介导的白细胞介素10基因对NOD鼠1型糖尿病早期胰岛13细胞的保护作用捅要目的观察腺病毒介导白细胞介素10(rlL-lO)基因对NOD鼠l型糖尿病早期胰岛13细胞的保护作用。方法复苏并培养293细胞,并扩增携带有白细胞介素10基因的腺病毒(Ad-dL-]0)和含有空载体的腺病毒(Ad-eGFP),4-5周龄的清洁级NOD小鼠(体重20.
2、239)46只,随机分为:对照组:①空白对照组10只,②糖尿病对照组12只;实验组:③腹腔注射Ad-rlL-10组12只,④腹腔注射Ad—eGFP组12只。①组不做任何处理,②.④组于自由喂养1周后第1、14天给予环磷酰胺200mg/kg腹腔注射促发糖尿病,成模后②不做任何处理,③给予腹腔注射含Ad-rlL-10的病毒液0.1ml,④给予腹腔注射含Ad-eGFP病毒液0.1ml。所有小鼠自由饮食,每周测定体重、血糖,成模3周后处死小鼠,立即取出胰腺,中性福尔马林固定,石蜡包埋固定做病理切片HE染色及免疫组
3、化观察胰腺炎症浸润程度和IL.10局部表达程度,留取小鼠血液标本,离心取血清,测定血清刀阶『-%IL-4,IL-IO和C肽水平。结果①组与②、③、④组相比血糖水平及体重变化有明显差异,但②、◎、④组组间比较差异无统计学意义;胰腺切片苏木素伊红染色(HE染色)示②、③、④组组间胰岛炎无明显差异,免疫组化示③组rlL.10表达水平明显高于①、②、④组;ELISA法测IFN-7、IL-4、IL-10和C肽表达水平示②、③、④组组间无明显差异。结论rlL-lO基因对NOD鼠1型糖尿病早期胰岛13细胞无明显保护作用
4、。硕士研究生:张芳萍(儿科学)指导教师:李堂教授关键词:白细胞介素10;腺病毒;NOD鼠;1型糖尿病;基因治疗I剃?,m0硼8舢黼8帆3帆811l\2瓯YTheProtectiveRoleofAdenovirusVectorMediatedInterleukin10(rlL-Io)GeneOilType1DiabetesMellitusofNODmiceAbstractObjectiveToinvestigatetheprotectiveroleofadenovirusvectormediatedinte
5、rleukinlO(rIL-lO)gene011type1diabetesmellitusofNODmice.MethodsCulture293celltoamplifyadenovims.Forty-sixNODmiceagedfrom4to5weekswererandomlydividedintofourgroups.Group1isnormalcontrolgroupwith10micewithoutspecialdisposal.Groups2to4whichcontains12miceineac
6、hofthemreceivedintraperitonealinjectionofCyclophosphamide200m眺g·d011the1髓and14也dayinordertoinducetypeldiabetesmellitus.RandombloodglycemiaweremeasuredafterinjectionofCyclophosphamide,hi曲erthan16.7mmol/Lisregardedasearlydiabetesmellitus.Group3receivedintra
7、peritonealinjectionofadenovirusvector,mediatedrIL广lOgene0.1m1.Group4receivedintraperitonealinjectionofadenovi^svectormediatedeGFP.Threeweekslater,allmicewereexecutedandfixedpancrestainformalinfor12-24hours,thenembeddedinparaffin,andsectioned.Weobservedthe
8、incidenceofdiabeticmellitus,thedegreeofinsulitisandtheexpressionoflL-10detectedbyimmunohistochemistry.DetectedIL-10,IL4,INF-Y,C-peptidebyenzymelinkedimmunosorbentassay.ResultsComparedwithgroup1,averagebloodglucosele
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