束缚应激过程中crh损伤小鼠卵母细胞发育能力的作用机制

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1、山东农业大学硕士学位论文束缚应激过程中CRH损伤小鼠卵母细胞发育能力的作用机制姓名：魏德莉申请学位级别：硕士专业：基础兽医学指导教师：谭景和20120614山东农业大学硕士学位论文中文摘要随着社会的快速发展和自然灾害的频繁发生，人们面临的压力(应激)越来越大，有研究表明女性更易受到应激相关心理疾病的影响。从繁殖学的角度讲，应激会造成雌性生殖内分泌紊乱或退化性疾病和女性早衰。因此，我们利用本实验室建立的束缚应激模型，PMSG处理24h的小鼠进行束缚，持续处理24h，系统研究了束缚应激对卵丘凋亡、类固醇激素发生的影响，并探讨了束缚应激造成卵母细胞发育能力下降过程中促肾上腺皮质激素

2、释放激素(CIⅢ)的作用机制。研究结果表明：‘(1)无论是刚取出的新鲜的卵丘卵母细胞复合体(COCs)还是经添加血清、生长因子和激素(SGH)的完善成熟培养液成熟培养后的COCs，应激组和对照组卵丘细胞凋亡比例并没有显著差异。而经不添加SGH的不完善成熟培养液培养后的COCs，两组卵丘细胞凋亡比例差异显著。(2)在添加或不添加SGH的成熟培养液中培养，应激组和对照组COCs在成熟率和孤雌激活率上没有明显差异，但其囊胚发育能力差异显著。束缚应激损伤了小鼠卵母细胞胚胎发育能力。(3)束缚应激能显著上调卵巢和血清中的皮质醇水平。(4)束缚应激能显著上调卵巢和血清中的孕酮水平，下调雌

3、二醇水平。然而，应激导致卵巢中睾酮水平下降，血清中睾酮水平却升高。总之，束缚应激损害了类固醇发生能力。(5)束缚应激能显著下调卵巢和血清中的IGF．1水平，引发凋亡。(6)束缚应激显著上调卵巢和血清中的CRH水平，从而影响类固醇激素的产生。束缚应激导致卵母细胞中CRH水平上升，大约是对照组的1．4倍。(7)通过免疫组织化学，我们发现CRHRl主要在卵巢基质、黄体细胞和窦状卵泡的膜细胞中表达，在卵丘细胞中也有少量表达。束缚应激能够显著上调卵巢膜细胞上的CRHRl，这可能抑制睾酮的分泌从而间接地抑制雌二醇的发生。(8)束缚应激能够显著上调整体卵巢和卵丘细胞中的CRHRl，分别是对

4、照组的1．5倍和1．75倍。而应激组卵母细胞CRH表达水平也上升，这就组成了一条完备的CRH通路，从而影响后续培养过程中凋亡的显现和胚胎发育。关键词：束缚应激；卵丘凋亡：胚胎发育；CRI-I；CRHRl类固醇Mechanismsbywhichcorticotropin—releasinghormoneimpairsmouseoocytedevelopmentalpotentialduringrestraintstressAbstractWiththefastdevelopmentofthesocietyandthehappeningofnaturaldisaster,thep

5、ressurethatpeoplefacedisbecomingstrongerandstronger．Womenaremoresusceptiblethanmentostress‘relatedmentalillnessandtwiceaslikelytoexperiencedepression．TheeffectsofstressonreproductioninfemalehavebeendemonstratedthatstresscanbringdisordertOthereproductiveendocrinesystem，andinduceanaplasiainre

6、productivesystemofwomen．Sointhisresearch，weinvestigatedtheeffectofrestraintstress，theemotionalstressmodleweestablishedbefore，onpercentagesofapoptoticcumuluscellsandlevelsofsteroidhormonesinovariesandserum．Furthermore，weinvestigatedthemechanismsofCRHinimpairingmouseoocytedevelopmentalpotenti

7、alduringrestraintstress．Ourresearchdemonstratedthat：(1)NodifferenceWasobservedinpercentagesofapoptoticcumuluscellsbetweencontrolandstressedmicebeforeoraftercultureofCOCswithserum，growthfactorandhormone(SGH)．Thedifferencebecamesignificantafterculturewitho