α-硫辛酸在小鼠卵母细胞老化过程中的作用

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2、家桥讲师，巧州大学，江苏扬州，２２５００９申请学位级别：硕壬学科专业名称：格床兽医学论文提交日期：２０１５年４论文答辩口期：２０１５年６月ＪＬ．，扔三：＾，学位授予单位：扬州大学学位授予日期：２０１５年６月＿＿＿＿＿—雜訂费答辩委员会主席；■－■■■－．讓ｆ，、＇ｓ＾，養＇－．．－，：、＾奔壽ｖ＿Ｘ铃：：＾苗，＇＇？．‘Ｓｆ．．：＇一？；、方．护汽成＾、杉．’＇＊＇＇．一六ｔ、＇方一；－？＇－＾？－Ｖ处ｒ巧：兴；表雪争．．轉，肩；《年６月．．、．．；訂严，吝、＇

3、’—’＇ｆ－一…心：；．乂Ｘ产嘴―＞？声據滅＇—、‘畔苗争＂．．一＾产峰．＂若．．請穴古叫知Ｖｆ乂接續巧户：：．ａ－硫辛酸在小鼠卵母细胞老化过程中的作用－Ｕ民ｏｌｅｓｏｆａｐｏｉｃａｃｉｄｄｕｒｉｎｏｓｔｏｖｕｌａｔｏｒａｉｎｏｆｍｏｕｓｅｇｐｙｇｇｏｏｃｙｔｅ研究生：张晓学科：临床兽医学导Ｕ：ｉＰ刘宗平教授扬州大学２０１５年６月ｇ＾１张晓：硫辛酸在小鼠卵母细胞老化过程中的作用＿中文摘要哺乳动物的繁殖能力受多种因素的影响，动物个体本身的衰老和生殖细胞的老化严重影响动物的繁

4、殖效率，而其中卵母细胞的老化严重降低７雌性动物的繁殖能力。受各种原因的影响，卵母细胞会发生不同程度的老化，这不仅造成体内外受精率降低，胚胎质量低下，早期妊娠流产可能性増加，后代发育异常等问题，而且限制了体外受精ＵＶＦ＾体细）Ｉ胞核移植（ＳＣＮＴ）及胞浆内单精子注射（ＩＣＳ）等技术的快速发展及广泛应用。因此研一－－究卵母细胞老化及调控机制显得尤为重要。ａ梳辛酸（ａｉｏｃａｃｉｌｐｉｄ）是种存在于线粒体，化乎对所有自由基均有清除作用，内的生物抗氧化剂。本研究Ｗ小鼠卵母细胞为材料在－Ａ）研巧卵巧细胞老化进程的基础上，通过体外添加ａ硫辛酸（Ｌ，

5、采用体外受精、孤雌激、－活免疫策光等技术，研究其在卵母细胞体外老化过程中的作用，同时探讨ａ硫辛酸和自幢在抗老化过程中的作用和联系。ａ－１、硫辛酸延缓卵母细胞的体外老化进程在卵母细胞的体外老化过程中，体外受精率显著下降，由老化前的８７．．７１％±６３５％下降至６７．５５％±６．４４％，同时受精后的细胞异常率升高，由老化前的２．０５％±２．１２％升高至±４１２８５％２０％，，，８．．细胞极性丢失（肌动蛋白帽丢失）纺键体形态发生异常组蛋白Ｈ４Ｋ２乙醜化水ｏａ－和Ｈ４Ｋ１平升高。在卵母细胞体外老化巧程中添加１０＾ｉｍｌ／Ｌ的硫辛酸后

6、，与未添加组（正常老化）相比．±，卵母细胞的体外受精率升高至８３１９％８．００％受精后的；异常率下降至４．０７％，，，组蛋白Ｈ４Ｋ８．４６％±２纺键体形态趋于正常细胞极性尚存和Ｈ４Ｋ１２乙醜化水平较低－。结果表明ａ硫辛酸可Ｗ延缓卵母细胞的体外老化进程。－２、ａ硫辛酸抑制体外老化卵毋细胞中自嗟水平的升髙，首先，检测了卵母细胞体外老化过程中的自唆水平。结果表明在卵母细胞体外老化民－ｌＯｈ内，自睡水平呈逐渐升高的趋势。其次，添加自喧增强剂（ａｐａ）或自唆抑制剂（３ＭＡ）来为干扰自唾水平后，检测卵母细胞老化进程，ａ，。结果显示与未处

7、理组相比添加Ｒａｐ后＜＾＜卵母细胞的体外受精率极显著降低０１，受精后的异常率显著升高〇ｐｐ．〇５与此（）（）；－＜化０相反的，用３ＭＡ处理后，卵母细胞的体外受精率升高５，受精后的异常率则显著出）＜化－下降０５）。最后，在卵母细胞体外老化过程中添加（Ｘ硫辛酸后，检测老化卵母细胞的（ｐ－自嗤水平，结果表明自嗤水平受ａ硫辛酸的影响出现了下降。这说明卵母细胞在体外老化－－，而ａ硫辛酸可Ｗ抑制其升高的程度过程自隨水平会出现升高，ａ硫辛酸可能通过抑制自嗤水平的升高来延缓卵母细胞的老化。－，ａ硫辛酸通过提高体外受精率综上所述、抑制细胞极性的丢失、抑制组

8、蛋白修饰水扬州大学硕