柞蚕蚕虫草人工培养研究1

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1、柞蚕虫草人工培育研究孟楠，李亚洁，李学军，温志新，石理鑫，米锐，孙永欣（辽宇省农科院大连生物技术研究所，大连116024）摘要：选用感染力强、生产性能优良的蛹虫草菌种对柞蚕五龄幼虫接种试验，同时对培养基配方进行了筛选，通过采用不同接种方法，进行柞蚕蚕虫草的人工培育研究，并培育出了优良的蚕虫草。关键词：柞蚕虫草培养寄主冬虫夏草（Cordycessinensco）是最著名的虫生真菌，但因其生活环境特殊，目前不能人工培育。人工培育的蛹虫草,在营养价值、活性成分和医疗保健功效等方面，都和冬虫夏草相似，但不像冬虫夏草那样需要特殊生存环境和专一寄主⑴。作为冬虫夏草的代用品，目前

2、蛹虫草的研究开发主要有发酵菌丝体、米饭子实体和蚕蛹虫草三个方而[2]o我们在成功进行发酵培养、米饭培养和蚕蛹培养的基础上，进行了以5龄柞蚕为寄主培育蚕虫草的研究，以期找到新的寄主和最佳接种方式。而蚕幼虫较蛹所需时间短,节省劳动力，成本低，可取得更可观的经济效益，从而为蚕业发展开拓一个新的领域。1材料与方法1■1材料1.1.1五龄柞蚕购自辽宁庄河山区。1.1.2菌种蚕的生命力旺盛，对虫草菌的抵抗力很强。培养蚕虫草的第一个关键，是获得对蚕感染力强且生产性能优良的虫草菌株（L1）。我所多年来致力于对北虫草菌的研究，在反复筛选的基础上进行驯化，获得对蚕有良好感染力的菌株。该

3、菌株菌丝生长吒盛，见光转色较快，栽培周期较短，子座较粗长，产量较高。以下各项试验研究所用菌种，皆为该菌株。1.2方法1.2.1菌种研究1.2.1.1培养基筛选本试验设4种母种培养基配方：①马铃薯200g,葡萄糖20g,MgSO.O.5g,KHP041.5g,VB^Omg,琼脂20g;②马铃薯200g,葡萄糖20g,作者简介：孟楠（1980-），女，辽宁沈阳人，研究实习员，联系方式：0411-88225669Email:mona0408@163.com发表刊物：辽宁农业科学2009年2期第63页MgSO.O.5g,KI1PO41.5g,蛋白腺20g,VB^Omg,琼脂

4、20g③马铃薯200g,葡萄糖20g,MgSO40.5g,KHP041.5g,牛肉膏20g,VB^Omg,琼脂20g④马铃薯200g,葡萄糖20g,MgSO40.5g,KHPO41・5g,酵母粉20g,VB^Omg,琼脂20g以上均为1000ml的用量，制作方法和接种操作均同普通培养基1.2.1.1菌种筛选菌种是蚕虫草生长好坏的重要因素，我所除了精心筛选的菌种L1以外，还获得从冰峪沟野生出土的菌种Ml,在对柞蚕蛹虫草的培养试验屮效果不错，为获得更优秀的柞蚕虫草，我们对L1与Ml菌种进行比较①L1菌种接种50头，②Ml菌种接种50头。穿刺蚕体接种，在同种培养条件下培养

5、，出草后观察。1.2.1接种研究1.2.2.1接种方法我们选择5龄桑蚕作寄主，一方面柞蚕在5龄时体大肥硕，所得蚕虫草也大;另一方面此时的蚕还未吐丝，占体重40%左右的丝腺蛋白成为虫草菌的营养，所得蚕虫草的营养和活性成分最高。但5龄大蚕抗病力很强，很难接种感染虫草菌。我们试验了多种方法，以解决这一难题。①液体菌种喷洒蚕体；②液体菌种喷洒柞树叶喂蚕；③液体菌种喷洒蚕体加柞树叶；④固体菌种接触蚕体；⑤液体菌种注射蚕体（2007/头，针头平行体表）；⑥液体菌种穿刺蚕体；1.2.2.2蚕体消毒处理接种方法采用菌液注射于穿刺，蚕体消毒采用75%洒精，工具注射针头消毒釆用酒精灯灼

6、烧。1结果与讨论2.1适宜培养基从表1可以看出，以配方②为最好，虫草菌萌发最早，菌丝最旺盛，转色最快，颜色最深，其次为配方③和配方④。配方①最差，说明配方①中营养成分不如其他配方适合虫草菌，而该配方是最普通的虫草菌配方。配方②中有高含量的蛋白腺，它正好满足虫草菌的营养需要。配方③中动物蛋白较配方③太过多，故而造成徒长;配方④虽无动物蛋口，但效果也较好，说明虫草菌并非一定要动物源营养成分，酵母中也存在有于虫草菌生长的因子。表1母种培养基接种虫草菌后的表现光照转色颜色培养基接种后菌丝生长情况编号2d7d15d①②③未萌发全部萌发萌发萌发旺盛较旺盛不旺盛很旺盛满管旺盛未满

7、色色齟转d8d色6第转第色色色黄红黄④萌发较旺盛旺盛未满第4d转色橙黄色注:光照从第10d开始,采用日光灯人壬光照，每天12ho2.2适宜菌种筛选从表2可以看出驯化菌种L1菌丝生长旺盛，见光转色较快，栽培周期较短；野生菌种Ml见光转色较慢，栽培周期较长，但经7d后子座较L1粗长，产量也较高，生长较旺盛说明野生菌株还有待驯化后可以变成生长力较强，适应栽培环境的好菌株。表2蚕接种两种菌种后的各H表现菌种接种后菌丝生长情况光照转色成草后虫草状态7d15d30d40dL1萌发全部萌发很吒盛停止生长15d转色菌丝长2.5cm一3.5cm直径2mm左右橙黄Ml未萌发萌发全部