检验实训课程标准

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1、任务一、血液细胞检查［实验目的与要求］1、掌握显微镜红细胞计数的原理和操作。2、掌握红细胞形态检查的方法、正常红细胞的形态特点、异常红细胞形态学变化。3、掌握显微镜白细胞计数的方法。4、掌握外周血白细胞分类计数的方法、各种白细胞的正常形态和病理形态学改变。［实验方法］1、学生分组：6-7人/组；2、教师通过ppt或操作示范等教学手段引导学生回顾血液细胞检查的相关基础知识；3、教师运用各种器材和试剂进行讲解、操作示范；4、学生分组进行操作练习；5、教师逐一指导、检查学生受训情况；6、教师总结学生受训情况。［实验条件要求］1、实验所需器材（设备）：显微镜、分

2、光光度计。2、所需耗材：采血用具一套，试管、试管架、吸管（2ml、5ml.0.5ml）、吸耳球、微量吸管、胶吸头、干脱脂棉、玻璃棒、改ClNeubauer计数板、盖玻片、绸布、香柏油、拭镜纸、清洁液（乙醯与无水乙醇比例3：7）3、试剂：（1）红细胞稀释液：枸椽酸纳l.Og,36%甲醛液1.0ml,氯化钠0.6g,加蒸镭水至100ml,混匀，过滤2次备用；（2）白细胞稀释液：2%冰乙醇溶液中加入10g/L结晶紫（或亚甲蓝）3滴。（3）瑞氏染液;（4）磷酸缓冲液（pH6.4-6.8）4、标本：EDTA抗凝静脉血或末梢血。［实验内容］1、相关基础知识回顾：红细

3、胞计数的检测原理，氤化高铁血红蛋白测定的原理，白细胞计数的原理，白细胞分类计数的原理。2、操作要点讲解及示范：（1）红细胞计数：准确稀释红细胞，充分冲池，计数计算。（2）红细胞形态检查：血片的制作和染色。（3）口细胞计数：准确稀释血液，充分冲池，计数计算。（4）口细胞分类计数、口细胞形态：血涂片制备，染色，镜检。3、学牛操作练习。4、教师总结学生操作情况。［实验评分］血液细胞检查评分标准项目名称操作要求标准分扣分实得分准备口大衣穿戴整齐（1分），教材、实验报告、中性笔等用品准备齐全（1分），按学号正确取放显微镜，检查显微镜并填写显微镜使用登记本（2分），

4、检查并放置好相关实验物品（1分）5操作红细胞计数准确加入红细胞稀释液（2分）；消毒皮肤，准确取血（2分）；擦去管尖外面多余的血液，插入稀释液底部，吸取其上清液清洗吸管；充入血细胞计数池内，注意充池的液量要适宜，使之恰好充满，无气泡及多余液体溢出（5分）。静置2〜3min,使红细胞下沉（2分）。将血细胞计数板置于显微镜下，用低倍镜观察计数池内红细胞分布状况是否均匀（2分），如红细胞分布均匀，即可用高倍镜进行计数（5分）。计数完毕后，用清水将计数盘和盖玻片冲洗干净，待干后备用（2分）。20红细胞形态检查血涂片制备：取末梢血一滴，置于载玻片一端（1分），将推片

5、的一端，放在血滴前面，逐渐后移接触血滴，血滴即沿推片散开（2分），然后使推片与载玻片间以30〜45°夹角（2分），平稳向前推动至载玻片的另一端，玻片上便留下一均匀的薄层血膜（2分）。自然干燥（1分）。染色：①用蜡笔在血膜两头划线，以防染液溢岀（1分）；②用瑞氏染液3〜5滴，覆盖整个血膜，固定细胞0.5〜lmin（2分）；③滴加等量或稍多缓冲液于血膜上，用吸球将其吹匀，染色5〜lOmin（2分）；④平放玻片，用流水从玻片的一侧冲去染液，待血片自然干燥或用滤纸吸干，即可镜检（2分）。镜检：在低倍镜下观察细胞着色情况，然后选择血涂片体尾部，在油镜下遵循数上不数

6、下、数左不数右的原则，按一定的方向顺序观察红细胞形态。（5分）20白细胞计数用刻度吸管准确吸取稀释液0.38ml,置于试管内（3分）。用一次性微量吸管采末梢血20ul（3分）。擦去管尖外部余血，将吸管插入稀释液底部，轻轻将血全部排岀，然后吸取其上清液清洗吸管残余血液2〜3次（6分）。混匀后静置5min,待红细胞完全溶解后，充入清洁而干燥的计数池与盖玻片的缝隙中（3分），静置2〜3min,使白细胞下沉（3分）。计数:在低倍镜下，计数四角的四个大方格中的白细胞数（W）（9分）。计数完毕后，用清水将计数盘和盖玻片冲洗干净，待干后备用（3分）。30白细胞分类计数

7、、白细胞形态检查血涂片制备:取末梢血一滴，置于载玻片一端（1分），将推片的一端，放在血滴前面，逐渐后移接触血滴，血滴即沿推片散开（2分），然后使推片与载玻片间以30〜45°夹角（2分），平稳向前推动至载玻片的另一端，玻片上便留下一均匀的薄层血膜（2分）。自然干燥（1分）。染色:①用蜡笔在血膜两头划线，以防染液溢出（1分）；②用瑞氏染液3〜5滴，覆盖整个血膜，固定细胞0.5〜lmin（2分）；③滴加等量或稍多缓冲液于血膜上，用吸球将其吹匀，染色5〜lOmin（2分）；④平放玻片，用流水从玻片的-•侧冲去染液，待血片自然干燥或用滤纸吸干，即可镜检（2分）。镜

8、检:在低倍镜下观察细胞着色情况，然后选择血涂片体尾部，在油镜下按一定的方向顺序对