快速检测大肠杆菌o1573ah7胶体金免疫层析方法的建立

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1、Abstractwim26bacteriastrainsshowedthatonlyStaphylococcusaureus(CMCC26003)andSalmonellatyphimurium(ATCC13311)hadslightcrossreaction，whereastherest24strainshadnocrossreaction．Thepreservationtestat37"Cindicatedthatthestripscouldbestoredatroomtemperatureformorethan15montllS．Th

2、estripsshowedpositiveresultafterinoculatingEcoliO157：H7insamples(beeforlettuce)at10to100CFU／25gandincubatingfor6h．Inordertoincreasethespecificityandsensitivityoftheassay，Balb／cmicewereimmunizedwithflagellumproteinsisolatedfromEcoliO157：H7．Afterfusionandcloning，fourhybridom

3、acellswhichwouldstablesecretantibodyS_againstEcoli0157：H7wereabtainedandpreparedasciticfluid．Thematchingresultsshowedthat5pairsofantibodiescouldbeusedforstrippreparation．Keywords：EscherichiacoliO157：H7；polyclonalantibody；colloidalgold；immunochromatography；monoclonalantibod

4、yIII缩略语表IV缩略语表目录摘j19l：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯．⋯⋯．⋯．⋯．⋯⋯⋯．⋯⋯．⋯．⋯⋯⋯．⋯．⋯⋯⋯．⋯．．⋯⋯⋯．⋯⋯．⋯．⋯⋯IABSTRACT⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．II缩略语表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯IV第一章引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．11．1Ecoli0157：H7的临床表现和感染⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．2Ecoli0157：H7的特异性抗原和抗体制备研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯21．2．1Ecoli0157：H7的O抗原⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．21．2．2Ecoli0157：H7的H抗原⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．21．2．3其它特异性抗原⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．31．3Ecoli0157：H7检测方法的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41．3．1常规检测方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．41．3．2基于PCR的分子生物学方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．51．3．3免疫学检测方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．61．3．4新兴技术⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．71．4胶体金快速检测技术的概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．71．4．1胶体金的性质⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81．4．2胶体金制备方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81．4-3胶体金标记抗体⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81．4．4免疫胶体技术在微生物检测中的应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯k⋯⋯91．5展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯．9第二章抗大肠杆菌0157：H7多克隆抗体的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯lO2．1前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．102．2材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯102．2．1菌株、免疫动物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯102．2．2主要试剂和仪器设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．102．2．3相关试剂和培养基配置⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯102．2．4Ecob0157：H7抗原制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

8、⋯⋯⋯⋯⋯⋯112．2．5其它菌株包被原的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯122．2．6动物免疫⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯122．2．7间接