大疱性类天疱疮患者头发毛囊内igg抗体沉积的分析

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1、英文缩略语·5·前言大疱性类天疱疮(bullouspemphigoid，BP)是一种临床上以不易破溃的水疱、大疱为特征的慢性自身免疫性皮肤病¨。。，好发于老年人，其主要的病理改变是表皮下水疱形成，疱腔内可见嗜酸性粒细胞浸润，尼氏征阴性(一)；免疫荧光检查示真表皮交界处C3和tgG等呈线状沉积，在患者血清中可检测到类天疱疮抗体M-8】。大疱性类天疱疮确切的发病机制目前仍不是十分清楚，一般认为是由于基底膜带的抗原抗体反应，激活补体，引起肥大细胞和中性粒细胞游走浸润，产生包括嗜酸性粒细胞趋化因子在内的细胞因子，导致表皮下水疱形成并伴

2、有嗜酸性粒细胞在水疱部位的浸润归‘1“。组织病理和免疫病理检查对于诊断和鉴别诊断大疱性类天疱疮有着十分重要的意义，但活体病理组织取材时会给病人带来很大痛苦。临床工作中，免疫荧光已作为常规方法，在大疱性类天疱疮的诊断和鉴别诊断中具有重要意义。间接免疫荧光检测表明70—80％患者血清中有抗表皮基底膜带的循环抗体，主要是IgG。病变严重程度和活动性与大疱性类天疱疮血清抗体滴度平行关系不甚明显。Messenger坤1等用免疫组织化学方法研究发现，在毛囊外毛根鞘基底膜带BPAGs呈线状分布，从毛囊漏斗都向下一直延伸到毛球顶端。由于头皮部

3、血管丰富，BPABs有可能随大量血液灌注头皮，在毛囊的相应靶抗原处沉积。因此，毛囊直接免疫荧光检查对于大疱性类天疱疮的快速诊断以及与天疱疮进行鉴别诊断，可能会具有重要的临床实用价值。本研究拟通过检测大疱性类天疱疮患者拔出的头发上残留毛囊中类天疱疮抗体的沉积情况，以期建立一种快捷、损伤小的检测方法。材料和方法一、材料：1．病例：23例大疱性类天疱疮患者来源于我院，男17例，女6例。均经临床、组织病理和免疫荧光检查证实。23例患者均为疾病活动期，其中6例曾经不规则应用皮质类固醇激素，未用免疫抑制剂治疗；7例患者未用皮质类固醇激素及

4、免疫抑制剂治疗；其余10例患者均曾用皮质类固醇激素·6·和免疫抑制剂联合治疗。每例类天疱疮患者拔取带有毛囊的头发约20根。5例天疱疮患者为我院住院患者，均经临床、组织病理和免疫病理检查确诊，每例患者拔取带有毛囊的头发约20根。10例健康人，每人拔取带有毛囊的头发约10根。2．主要试剂：FrrC标记的羊抗人I薛抗体购自美国SIGMA公司。二、方法：从每例类天疱疮患者头上拔取的约20根头发中挑选带有毛囊的头发10根，无水乙醇固定5分钟后，PBS洗5IIlinx3次，加入Fn℃标记的羊抗人IgG抗体(稀释度；1：64)，37℃水浴3

5、0nlin，PBS洗5miⅡx3次，荧光显微镜观察结果。结果1．大疱性类天疱疮患者23例，男17例，女6例，平均年龄63岁。发病时间lO天～2年。临床表现：23例患者均表现为躯干、四肢的红斑、水疱和大疱，尼氏征阴性，不伴口腔粘膜损害。2．组织病理：23例患者均为表皮下水疱，无棘刺松解，疱腔内嗜酸性粒细胞浸润为主。真皮浅层血管扩张，血管周围有淋巴细胞及数量不等的嗜酸性粒细胞浸润。免疫病理：23例患者皮损的直接免疫荧光阳性率为100％，表现为真表皮交界处基底膜带C3和／或IgG呈线状沉积，其中C3沉积阳性22例，阳性率为95．7％

6、，IgG沉积阳性15例，阳性率为65．2％。23例患者中20例进行了间接免疫荧光检查，3例未做。20倒中17例为不同滴度的豚鼠舌基底膜带IgG呈线状沉积，阳性率为85％，3例为阴性。大疱性类天疱疮抗体滴度高低不一(表1)，直接或间接盐裂荧光示lgG沉积于表皮侧。3．头发的直接免疫荧光：23例大疱性类天疱疮患者中20例呈阳性结果，阳性率87．0％，3例阴性(表1)。经)(2检验(P>0。05)，皮损中大疱性类天疱疮IgG抗体沉积阳性率65．5％与头发大疱性类天疱疮IgG抗体沉积阳性率87．0％无显著统计学差异。荧光标记的IgG抗

7、体在毛囊表皮下的外毛根鞘与结缔组织鞘之间呈明显的线状沉积，从毛囊漏斗部向下一直延伸到毛球顶端(图1、2)。5例天疱疮患者高倍镜下均无线状沉积，而呈细胞间沉积(图3)。10例正常人均为阴性(图4)。·7·表1类天疱疮患者头发毛囊直接免疫荧光检测结果编性拄头发毛囊直接号别龄诊断组织病理直接免疫荧光间接免疫荧光免疫荧光真表皮交界处C3呈阳性外毛根鞘外层IgG呈1男82类天疱疮表皮下水疱线状沉积滴度1：16线状沉积真表皮交界处瑶G、阳性外毛根鞘外层IgG呈2女83类天疱疮表皮下水疱C3呈线状沉积滴度1：512线状沉积真表皮交界处IgG

8、、外毛根鞘外层IgG呈3男53类天疱疮表皮下水疱未做c3呈线状沉积线状沉积真表皮交界处c3呈阳性外毛根鞘外层IgG呈4男7l类天疱疮表皮下水疱线状沉积滴度1：4096线状沉积真表皮交界处Igc呈5男19类天疱疮表皮下水疱阴性线状沉积6男60类天疱疮表皮下水疱具霸厘父界她u莹阳