线粒体dna编码蛋白质在炎症反应中作用的初步探讨

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1、解放军医学院硕士学位论文线粒体DNA编码蛋白质在炎症反应中作用的初步探讨中文摘要目的创伤导致机体出现全身炎症反应综合征，甚至发生多器官功能衰竭。目前认为创伤后大量线粒体破裂，线粒体内由其自身DNA编码合成的蛋白质释放入血，是导致无菌性炎症的重要因素。细胞色素b是由线粒体DNA编码合成的一种蛋白质。本文通过动物实验分析细胞色素b和炎症反应相关性、体内实验细胞色素b活化巨噬细胞释放炎症因子的检测、体外实验大鼠膝关节腔内注射细胞色素b诱导关节炎发生三部分，初步探讨细胞色素b在无菌性炎症反应中所起的作用

2、,为严重创伤后SIRS的发生、多器官损伤及相关并发症的研究提供新思路。方法第一部分动物实验：制备大鼠双侧股骨干骨折模型，分别在创伤后第1小时、2小时、4小时、6小时、8小时、10小时、12小时、24小时、36小时用酶联免疫吸附试验法（ELISA）观测外周血中Cyt-b、TNF-α、IL-1、IL-6的表达；第二部分体外实验：将大鼠腹腔巨噬细胞分为培养基对照组、mtDNA（10ug/ml）组；Cyt-b（0.1ug/ml）组、Cyt-b（1ug/ml）组、Cyt-b（10ug/ml）组共5组进行刺

3、激，分别在0小时、2小时、4小时、8小时、12小时、24小时和36小时，用酶联免疫吸附试验法（ELISA）观测培养液中TNF-α、IL-1、IL-6、的表达水平；第三部分动物实验将大鼠分为空白对照（缓冲液）组、mtDNA（10ug/ml）组、Cyt-b（10ug/ml）组，分别进行膝关节内注射，5天后用HE染色观察膝关节病理学变化。实验资料采用均数±标准误(x±s)表示。所有数据运用SPSS17.0统计软件采用组内t检验、组间F检验及相关回归分析进行差统计学处理，p<0.05表示差异有显著统计学

4、意义。结果1.创伤后大鼠外周血中细胞色素b含量在4小时达到高峰，后逐渐下降，TNF-α在6小时达到高峰，IL-10、IL-6于10小时达到高峰，后逐渐下降；细胞色素b与炎症反应呈正相关性。2.对照组和低、中浓度Cyt-b组三种炎症因子TNF-α，IL-1，IL-6表达没有明显变化趋势，高浓度Cyt-b组和mtDNA组炎症因子表达随时间变化增加。高浓度Cyt-b可活化大鼠巨噬细胞释放炎症因子TNF-α，IL-1，IL-6。3.关节内注射高浓度Cyt-b和mtDNA组的大鼠膝关节2解放军医学院硕士学

5、位论文病理学表现为明显炎症细胞浸润、滑膜增厚，关节炎发生率和严重程度均高于对照组。结论Cyt-b和创伤后炎症反应呈正相关，高浓度Cyt-b和mtDNA均能通过刺激巨噬细胞产生炎症因子，并在体外导致炎症反应的发生。关键词细胞色素b,炎症反应,巨噬细胞,关节炎3解放军医学院硕士学位论文ThepreliminarystudyofproteincodedbymitochondrialDNAintheprocessofinflammationAbstractObjectiveTraumaisaleadin

6、gfactorwhichcausesSIRS(systemicinflammatoryresponsesyndrome),evenMODS(multipleorgandysfunctionsyndrome).Itiswellknownthatthereisalargenumberofbrokenmitochondriaaftertrauma.TheproteincodedbymitochondrialDNAinmitochondriaisreleasedintothecirculationand

7、cantriggerinflammationthroughFPR.Cytochromebasoneoftheproteinshouldbeaimportantfactorwhichcausesinflammationwithoutmicroorganism.Thisstudyhave3parts.:First,analysestherelativitybetweenCytochromebandinflammation.;Second,Cytochromebactivatesmacrophagei

8、nvivo;Third,Micewereinjectedintra-articularlywithcytochromectoinducearthritis.ThewholeexperimentstudytheroleofcytochromecininflammationtoprovidethenewideaforthepreventionandtreatmentofSIRSandMODSaferseveretrauma.MethodsThefistpartofexperiment:Prepara