铁皮石斛f1代多糖与醇溶性浸出物变异规律探究

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1、铁皮石斛Fl代多糖与醇溶性浸出物变异规律探究［摘要］采用苯酚-浓硫酸法和醇溶性浸出物热浸法测定11个铁皮石斛F1代家系多糖和浸出物的含量，结果表明5月与2月采集的样品多糖质量分数分别为32、89%〜43、07%,25、77%〜35、25%,醇溶性浸出物质量分数分别为2、81%〜4、85%,7、90%〜17、40%,家系间存在显著差异；多糖含量低的亲本通过与多糖含量高的亲本杂交，能显著提高子代多糖含量，杂交优势明显，杂交育种是提高铁皮石斛多糖含量而进行品种选育的有效途径。采收时间显著影响铁皮石斛多糖和浸出物含量，所有家系5月采样多糖含量均高于2月，浸出物

2、含量则相反，但不同家系变化幅度差别很大，各个家系有其自身规律，研究铁皮石斛优良家系(品种)多糖和浸出物积累规律，确定其最佳采收时间，对充分发挥优良品种作用、提高药效具有重要意义。［关键词］铁皮石斛；种内杂交；多糖；浸出物［收稿日期］2013-04-04［基金项目］浙江省重大科技专项(2012C12912,2011C12002)［通信作者］*斯金平，教授，主要从事药用植物品种选育，E-ma订：lssjp@163、com铁皮石斛DendrobiumofficinaleKimuraetMigo具有益胃生津、滋阴清热等功效，多糖和醇溶性浸出物分别代表铁皮石斛的

3、大极性和中小极性主要成分，与药理作用有着密切的联系[1-6]o2010年版《中国药典》在“含量测定”项中规定干品铁皮石斛多糖质量分数不得低于25、0%,甘露糖规定质量分数为13、0%〜38、0%,浸出物规定醇溶性浸出物不得低于6、5%[7]。本文通过11个铁皮石斛F1代家系22个样品多糖和醇溶性浸出物含量测定，了解铁皮石斛种内杂交F1代多糖和浸出物的含量变异规律，为铁皮石斛良种选育提供依据。1材料紫外-可见分光光度计（ThermoScientificGENESYS10sUV-VIS）；KQ-500DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；DK-

4、S24型电热恒温水浴锅（上海森信实验仪器有限公司）；D-37520型高速离心机（德国Heraeus公司）；AB104-N电子分析天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）;DHG-9070HA精密型强制对流干燥箱（杭州蓝天化验仪器厂）。葡萄糖对照品（购自中国食品药品检定研究院，批号110833-200904）；重蒸酚（北京索莱宝科技有限公司）；其他所用试剂均为分析纯，水为蒸饱水。2012年5月1日和2013年2月6日，先后采集浙江省义乌市佛堂镇高效生态农业示范园区丹溪药博园内6aX2b,9X66,17X30,17X71,30X83,65X91,78X69,

5、86X56,99X31,124X140等10个Fl代全同胞家系和森山1号（CK）二年生萌条（铁皮石斛萌藥生理年龄），共22个样品。每个样品采样不少于25个萌条，1丛植株只采1个萌条，采样植株间隔2m以上。采集的样品在80匸杀青2h,60匸烘至恒重，粉碎，过60目筛，待用。供试亲本主要性状详见表lo2方法2、1多糖含量测定参照2010年版《中国药典》（一部）苯酚-浓硫酸法进行测定［7］。精密称定样品粗粉0、3g,加水200mL,加热回流2h,趁热过滤，将滤液转移至250mL量瓶中，用少量水分次洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，放冷，加水至刻度，摇匀。精密量取

6、续滤液5mL,置50mL离心管中，精密加入无水乙醇25mL,摇匀，冷藏lh,取出，离心（转速为4000r•min-1）20min,弃去上清液，沉淀加80%乙醇洗涤2次，每次20mL,离心，弃去上清液，沉淀加热水溶解，转移至50mL量瓶中，放冷，加水至刻度，摇匀。精密量取ImL样品溶液，加5%苯酚溶液lmL,混匀，精密加浓硫酸5mL,混匀，静置5min,沸水浴中加热20min,取出，置冰浴中冷却5min,以1mL水为空白，于488nm处比色，试验平行3次。以葡萄糖标样制作标准曲线，其回归方程为Y=8、9114X-0、0566,R2=0、9984,其中，Y

7、为吸收度，X为浓度。2、2浸出物含量测定参照2010年版《中国药典》（一部）附录VA项下热浸法测定，以乙醇作溶剂［7］。精密称定样品粗粉2g,置100mL具塞圆底烧瓶中，精密加乙醇50mL,密塞，称重，静置1h后，在85°C热水浴中回流，保持微沸1h,放冷后取下量瓶，密塞，用乙醇补足失重，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液25mL,置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105°C烘箱干燥3h,置干燥器中冷却30min,迅速精密称重，以干燥品计算供试品中醇溶性浸出物的含量。试验平行3次。2、3数据统计与分析利用Excel2003对所测数据进行整理，

8、SPSS18、0软件进行单因素方差分析和Duncan新复极差测验的多重比较分析。3结果与分析3