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时间:2019-02-18
《平胃散对湿阻中焦模型大鼠胃组织aqp1调控探究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、平胃散对湿阻中焦模型大鼠胃组织AQP1调控探究摘要:目的研究平胃散治疗湿阻中焦证的作用机理。方法采用免疫组织化学染色检测AQP1的分布,采用酶联免疫法(ELISA)测定AQP1的含量。结果AQP1主要分布在贲门和胃中的粘膜层。模型组AQP1表达降低;经平胃散干预后,与自然恢复组比较,AQP1的表达增加。结论对AQP1的调控是平胃散调节湿阻中焦证模型大鼠体内水湿的作用机制之一。关键词:平胃散湿阻中焦证水通道蛋白(AQP1)大鼠中图分类号:R322.4+4文献标识码:A文章编号:1005-0515(2013)3-018-02中医临床辨证发现,众多疾患常伴湿阻中焦证,致
2、使治疗难度增大,易加重或变生他证[1]。经典方平胃散具有“燥湿运脾,行气和胃”的功效,常用于对证治疗。近年来,对湿阻中焦证的研究主要集中在胃肠道等器官激素以及超微结构的变化等方面[2-4],而对水通道蛋白的相关研究报道较少。本实验通过研究湿阻中焦证模型中胃组织水通道蛋白APQ1的表达异常,探明平胃散参与调控体内水液代谢的作用机理。1材料和方法1.1实验动物分组SD大鼠50只,雌雄各半,体重180〜220g,检疫后备用。20只常规饲养,30只造模。1.2湿阻中焦证大鼠造模造模箱环境18〜251,湿度90%±5,模拟“久居湿地,外湿过盛”;造模大鼠单日禁食并灌胃41冰
3、水一次(2ml/只),双日供应充足饲料并灌胃熟猪油一次(4ml/只),模拟“饮食不节,饥饱失常”;每日9:00〜16:00置大鼠予4cm深的水中,控制睡眠时间7h,打乱生物钟,模拟“情志不遂”o连续200o造模结束当日,常规饲养组随机分为空白组和空白给药组,造模组随机分为湿阻中焦证模型组(模型组)、平胃散S3治疗组(平胃散组)和自然恢复组,每组10只;并把空白组和模型组大鼠处死取材。次日空白给药组和平胃散组给予平胃散汤剂灌胃(10ml/Kg),同时自然恢复组给予0.9%生理盐水灌胃(10ml/Kg),3日后处死取材。1.3试剂PBS缓冲液(博士德生物公司);AQP
4、S试剂盒,由四川大学华西医学中心基础同位素室提供。1.4标本收集与制备取大鼠胃贲门、冃体中间组织,用甲醛固定后,石蜡包埋,切片。1.5测定AQP1的分布采用免疫组织化学染色检测AQP1[5]O形态学评分标准:分5级,0或-表示阴性,无表达;1或土表示略阳性,似有表达;2或+表示阳性范围小,有表达;3或++表示阳性范围近一半,表达明显;4或+++表示阳性分布接近整个区域,表达十分明显。1.6测定AQP1的含量采用酶联免疫法(ELISA)测定。1.7数据统计数据处理用统计软件spssl3.0进行分析,数据以(土S)表示,采用单因素方差分析。2结果2.1一般情况空白组大
5、鼠始终毛色光亮,肥壮,食量好,活动灵活,未见大便澹泻等病理现象。模型组体重减轻,活动量小,皮毛色泽晦暗,毛发打络,造模第一周见脂肪包被样和脂肪样便;第二周见脂肪样便和黄褐色稀澹便,体重增长停止甚至下降,饮水、采食量明显下降;第三周,大便以黄褐色软便为主,粪质较前稍干,体重有增长趋势,饮水、进食量基本持平。造模结束后,平胃散组与自然恢复组体重增长明显。2.2AQP1在胃组织层中的分布2.3粘膜下组织AQP1测定由表2可知,胃贲门粘膜下组织AQP1水平与空白组比较,模型组和空白给药组均降低,差异极其显著(P0.05),但空白给药组有升高趋势;与模型组比较,自然恢复组表
6、达降低,与自然恢复组比较,平胃散组表达升髙,两组差异极其显著(P
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