平胃散对湿阻中焦证水调激素和水转运蛋白影响的研究

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1、ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine（基础医学院）二〇一八届硕士研究生学位论文平胃散对湿阻中焦证水调激素和水转运蛋白影响的研究ResearchonSyndromeofdampnessinmiddleJiaomodelaffectingWatermetabolismhormoneandWatertransportprotein,byPingweiPowder研究生姓名：陈芳指导教师：黄秀深教授学科专业：方剂学二○一八年五月成都中医药大学2018届硕士学位论文学位论文平胃散对湿阻中焦证水调激素和水转运蛋白影响

2、的研究ResearchonSyndromeofdampnessinmiddleJiaomodelaffectingWatermetabolismhormoneandWatertransportprotein,byPingweiPowder陈芳指导教师姓名：黄秀深教授申请学位级别：硕士专业名称：方剂学论文提交时间：2018年5月论文答辩时间：2018年5月二○一八年五月成都中医药大学2018届硕士学位论文中文摘要实验目的：通过对模型组大鼠尿液生成调节激素，钠钾泵活性，肝脏各类水转运蛋白表达、含量、mRNA的含量、磷酸化水平的系统研究探究湿阻中焦证对肝脏++Na

3、-K-ATP酶活性、尿液生成调节激素、水转运蛋白的影响及平胃散干预关系，++探讨平胃散是否通过影响Na-K-ATP酶活性，调整尿液生成调节激素失衡状态，使肝脏水转运蛋白含量、表达、活性发生变化，维持水盐平衡，揭示尿液调节激素与水转运蛋白在湿困脾胃后的作用机制，及平胃散对肝细胞跨膜物质转运功能的调控作机理。实验方法:湿阻中焦证造模后比色法测定肝脏钠钾泵活性，过氧化物酶法检测肝脏中葡萄糖含量，HPLC检测肝脏ATP含量，ELISA测定血清中各类激素和肝脏组织中SGLT1、GLUT2、NKCC1含量、PCR法测定肝脏组织SGLT1、GLUT2、NKCC1中mRNA

4、的含量，WB法测定肝脏组织中SGLT1、GLUT2、NKCC1磷酸化水平的影响。实验结果：1湿阻中焦证模型的评估：①对大鼠进行一般情况观察，湿困脾胃证大鼠形体消瘦，食欲较差，饮水明显减少，嗜睡倦卧。②湿邪侵袭后大鼠的胃肠运动和糖吸收异常，肝脏葡萄糖不能转化利用，ATP生成减少，钠钾泵活力降低。③湿困脾胃后各类水转运蛋白在肝组织免疫表达异常。④服药治疗后，模型组大鼠宏观体征、客观指标、病理损伤、免疫功能、代谢能力都有所改善。2尿液生成激素的含量造模后，与空白组对照，湿困脾胃证大鼠肾素、血管升压素、内皮素、肾上腺素、血管紧张素Ⅱ的含量出现降低，醛固酮和利钾尿肽的

5、含量升高；与湿困脾胃证大鼠比较，机体进行自我修复后或服用平胃散后肾素、血管紧张素Ⅱ、心房钠尿肽的含量均高于湿困脾胃证大鼠，内皮素、醛固酮、利钾尿肽、抗利尿激素、肾上腺素的含量均低于模型组；与自然恢复组比较，给予不同剂量中药治疗组中肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮、心房钠尿肽的含量高于自然恢复组，给予不同剂量的中药后，肾上腺素和血管升压素的含量低于自然恢复组大鼠；服用高剂量和中剂量中药组内皮素的含量高于恢复组，服用中药中剂量组利钾尿肽的含量高于I成都中医药大学2018届硕士学位论文自然恢复组，服用中药低剂量组内皮素的含量低于自然恢复组，用平胃散高剂量，和低剂量灌胃后

6、的大鼠利钾尿肽的含量明显比自然恢复组低。3肝脏水转运蛋白的表达、含量、mRNA的含量、磷酸化活性。（1）水糖协同转运蛋白免疫表达、含量、mRNA的含量、磷酸化活性变化湿困脾胃后，与正常组进行对照,湿困脾胃证大鼠肝脏中SGLT1的蛋白免疫表达出现上调，SGLT1的含量表现为降低，mRNA的含量降低，磷酸化活性降低；经过恢复后，与湿困脾胃证大鼠进行对照，恢复组肝脏中SGLT1的蛋白表达表现为上调，SGLT1的含量会降低，mRNA的含量出现降低，磷酸化活性升高；与自然恢复组比较，给予不同剂量的中药组肝脏中SGLT1的蛋白表达上调，SGLT1的含量升高，mRNA的含

7、量升高，SGLT1磷酸化活性降低。湿困脾胃后，与空白组进行对照，湿困脾胃证大鼠肝脏中GLUT2的蛋白表达表现为下调趋势，GLUT2的含量出现降低，mRNA的含量降低，磷酸化活性降低；与湿困脾胃证大鼠进行对照，自然恢复后肝脏中GLUT2的蛋白表达出现下调趋势GLUT2的含量升高，mRNA的含量升高，磷酸化活性升高；与恢复组比较，给予不同剂量的平胃散中药后肝脏中GLUT2的蛋白表达出现下调的趋势，GLUT2的含量高，mRNA的含量升高，平胃散低剂量组肝脏中GLUT2磷酸化活性升高，平胃散高、中剂量有降低趋势。（2）水盐协同转运蛋白免疫表达含量、mRNA的含量、磷

8、酸化活性变化造模后，与空白组进行对照,湿困脾胃证大鼠